miR-133靶向NLRP3对小鼠Kupffer细胞炎性活化的影响

• 作者: 徐秀亮 杨江华 梁曼曼 江启贵 盛皓宇 陈聪 鲁稻
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-133 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 库普弗细胞 炎症
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 854-859
• 页数: 6页
• 分类号: R363.2|R329.2+5
• 字数: 3757字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2020.05.012

摘要

目的:探究微小RNA-133(miR-133)靶向核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)对小鼠库普弗(Kupffer)细胞(KCs)炎症活化的影响.方法:从小鼠肝脏中分离KCs并鉴定.鉴定成功后用1 mg/L脂多糖(LPS)诱导KCs,并分别转染miR-133 inhibitor和miR-133 mimic.采用RT-qPCR检测细胞中miR-133和NLRP3的mRNA水平;ELISA法检测细胞培养液中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;Western blot实验检测细胞中NLRP3、含胱天蛋白酶募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和胱天蛋白酶1(caspase-1)蛋白水平;TargetScan查找NLRP3 mRNA的3'UTR与miR-133的结合位点,并经双萤光素酶报告基因检测试剂盒鉴定.结果:72 h时KCs体积较24 h时大,边界清晰,形态基本稳定;碳素墨水实验观察到细胞中有大量黑色颗粒,证明该细胞有较强的吞噬能力,为KCs.1 mg/L LPS诱导后KCs中miR-133水平降低,NLRP3 mRNA和蛋白、caspase-1蛋白及细胞培养液中IL-1β和TNF-α水平升高(P＜0. 05).转染miR-133 inhibitor后细胞中miR-133水平降低,细胞中NLRP3 mRNA和蛋白、caspase-1蛋白及细胞培养液中IL-1β和TNF-α水平升高(P＜0. 05);转染miR-133 mimic后细胞中miR-133水平升高,细胞中NLRP3 mRNA和蛋白、caspase-1蛋白及细胞培养液中IL-1β和TNF-α水平降低(P＜0. 05).TargetScan分析显示,NLRP3 mRNA的3'UTR含有miR-133序列保守碱基.转染miR-133 mimic的细胞萤光素酶相对活性下降(P＜0. 05).结论:miR-133可通过靶向NLRP3减轻小鼠KCs炎症,实现对KCs的保护.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨江华	皖南医学院附属弋矶山医院感染病科	57	176	7.0	10.0
2	鲁稻	池州市人民医院感染科	2	0	0.0	0.0
3	徐秀亮	池州市人民医院感染科	4	10	2.0	3.0
4	梁曼曼	皖南医学院附属弋矶山医院感染病科	11	38	4.0	6.0
5	盛皓宇	皖南医学院附属弋矶山医院感染病科	10	15	3.0	3.0
6	江启贵	池州市人民医院感染科	2	0	0.0	0.0
7	陈聪	池州市人民医院感染科	1	0	0.0	0.0