敲低Krüppel样因子4(KLF4)促进RAW264.7巨噬细胞向M1型极化

• 作者: 姬文婕 孙亮 李鑫 魏路清
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Krüppel样因子4(KLF4) 单核细胞 巨噬细胞 慢病毒 极化
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 782-787
• 页数: 6页
• 分类号: Q344+.13|R392.12|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 研究敲低Krüppel样因子4(KLF4)基因对RAW264.7巨噬细胞极化的影响.方法 采用RNA干涉技术(RNAi)构建敲低KLF4的慢病毒载体,转染RAW264.7巨噬细胞获得KLF4基因沉默的稳定细胞株.采用白细胞介素4(IL-4)刺激野生型、KLF4敲低组和阴性对照组巨噬细胞,反转录PCR检测细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及精氨酸酶1(Arg1)、IL-10、转化生长因子β(TGF-β)的mRNA水平,免疫细胞化学染色检测和定位巨噬细胞iNOS及Arg1蛋白.结果 敲低KLF4基因后,RAW264.7细胞的iNOS、IL-1β的mRNA含量明显增高,而TNF-α、Arg1、IL-10及TGF-β的mRNA含量则明显降低;IL-4处理野生型RAW264.7细胞后KLF4、Arg1、IL-10及TGF-β的mRNA的表达增加,iNOS、IL-1β及TNF-α mRNA的表达减少;IL-4处理敲低KLF4的细胞,其iNOS、IL-1β及TNF-α mRNA含量低于野生型组,但高于阴性对照组,而Arg1、IL-10及TGF-β mRNA含量较高于野生型组,而Arg1及IL-10低于阴性对照组;IL-4处理敲低KLF4细胞12 h后,与野生型细胞相比,iNOS蛋白表达显著减少,而Arg1的蛋白的表达则明显增加.结论 敲低KLF4促进RAW264.7巨噬细胞向M1型极化、抑制巨噬细胞向M2型极化.