miR-125a-5p通过靶向APAF1增强非小细胞肺癌细胞吉非替尼耐药性

• 作者: 孙忠哲 容宇 李传贵 李彦明 杨继雷 郝雁冰 陈万生
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 吉非替尼 非小细胞肺癌 A549/GR细胞 获得性耐药 miR-125a-5p 蛋白酶活化因子1 增殖 迁移 凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 622-628
• 页数: 7页
• 分类号: R730.54|R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2020.06.005

摘要

目的:探讨miR-125a-5p在诱导非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞吉非替尼(gefitinib,Gef)耐药中的作用及其机制.方法:选用人NSCLC耐药细胞株A549/GR和NSCLC细胞株A549,将miR-125a-5p mimic、miR-125a-5p inhibitor、pcDNA3.1-APAF1、空载体pcDNA3.1转染至A549/GR细胞.用qPCR检测细胞中miR-125a-5p的表达水平,用MTT法、Transwell小室法和流式细胞术检测Gef对细胞增殖、迁移和凋亡的影响.用双荧光素酶报告基因实验验证miR-125a-5p与细胞凋亡蛋白酶活化因子1(apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1)的靶向关系,用Western blotting检测A549/GR细胞中APAF1蛋白水平,用比色法测定细胞中caspase-3及caspase-9表达水平.结果:A549/GR细胞中miR-125a-5p表达水平显著高于A549细胞(P<0.01).敲降miR-125a-5p显著增强Gef对A549/GR细胞增殖、迁移的抑制作用(均P<0.05),并促进细胞凋亡(P<0.01).双荧光素酶报告基因实验证实miR-125a-5p靶向APAF1,并负调控其表达.进一步实验显示,miR-125a-5p通过靶向下调APAF1缓解Gef对A549/G细胞增殖、迁移的抑制作用及凋亡的促进作用(均P<0.05),减弱Gef引起的凋亡相关蛋白caspase-3及caspase-9表达的上调(均P<0.05).结论:miR-125a-5p促进NSCLC细胞Gef耐药,其机制是通过靶向APAF1而促进细胞的增殖、迁移并抑制凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李彦明	河北北方学院附属第一医院胸外科	21	132	7.0	11.0
2	杨继雷	河北北方学院附属第一医院老年科	12	109	6.0	10.0
3	孙忠哲	河北北方学院附属第一医院病理科	4	2	1.0	1.0
4	郝雁冰	河北北方学院附属第一医院胸外科	21	65	5.0	7.0
5	陈万生	河北北方学院附属第一医院胸外科	15	62	4.0	7.0