肝细胞生长因子诱导敏感非小细胞肺癌细胞对厄洛替尼耐药及机制研究

• 作者: 安昌善 崔晶刚 崔青松 朴红梅 王富佳
• 来源期刊: 中国全科医学
• 关键词: 癌,非小细胞肺 肝细胞生长因子 抗药性,肿瘤
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1076-1083
• 页数: 8页
• 分类号: R730.26
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2017.09.011

摘要

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)诱导敏感非小细胞肺癌(NSCLC)细胞对厄洛替尼耐药的机制,观察c-Met及其下游信号通道蛋白是否参与HGF诱导不同基因型NSCLC细胞对厄洛替尼耐药.方法 2014年1月—2015年1月,选择人NSCLC细胞株PC-9〔表皮生长因子受体(EGFR)突变型,敏感株〕、H292(EGFR野生型,敏感株)及人胚肺成纤维细胞MRC-5细胞,通过ELISA法检测PC-9、H292、MRC-5细胞培养上清液中HGF水平.用MRC-5细胞培养上清液诱导PC-9、H292细胞,采用Western blotting法检测c-Met及其下游通道蛋白表达情况.将56只雌性、SPF级BALB/c裸鼠随机分为8组,每组7只.在PC-9细胞诱导模型中,对照组(C组)和厄洛替尼处理组(E组)裸鼠皮下接种PC-9细胞悬液,MRC-5诱导组(H组)、MRC-5和厄洛替尼处理组(HE组)裸鼠皮下接种PC-9+MRC-5细胞悬液;当移植瘤直径达到4 mm时,C组和H组采用0.9%氯化钠溶液灌胃,E组和HE组采用厄洛替尼灌胃.在H292细胞诱导模型中,C组、E组裸鼠皮下接种H292细胞悬液,H组、HE组裸鼠皮下接种H292+MRC-5细胞悬液;模型建立后灌胃方式同PC-9细胞诱导模型.给药结束后处死裸鼠,比较PC-9、H292细胞诱导模型中各组移植瘤重量.采用免疫组化法检测裸鼠移植瘤组织中c-Met及其下游通道蛋白表达水平.结果 PC-9、H292细胞培养上清液中均未检测到HGF,MRC-5细胞培养上清液中HGF水平为(1262±90)pg/ml.Western blotting法结果显示,MRC-5细胞培养上清液中HGF能活化PC-9、H292细胞中p-Met、p-Akt、p-Stat3、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-Erk1/2)活性.PC-9细胞诱导模型中:E组移植瘤重量小于C组(P<0.05);HE组移植瘤重量小于H组,大于E组(P<0.05).H292细胞诱导模型中:E组移植瘤重量小于C组(P<0.05);HE组移植瘤重量小于H组,大于E组(P<0.05).c-Met、p-Met分别定位于细胞膜和细胞质.在PC-9、H292细胞诱导模型中:C组、H组、E组、HE组c-Met表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);H组、HE组p-Met表达水平分别高于C组、E组(P<0.05).Stat3定位于细胞质,p-Stat3定位于细胞核.在PC-9、H292细胞诱导模型中:C组、H组、E组、HE组Stat3表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);H组、HE组p-Stat3表达水平分别高于C组、E组(P<0.05).Akt、p-Akt均定位于细胞质.在PC-9、H292细胞诱导模型中:C组、H组、E组、HE组Akt表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);H组、HE组p-Akt表达水平分别高于C组、E组(P<0.05).Erk1/2定位于细胞质,p-Erk1/2定位于细胞核.在PC-9、H292细胞诱导模型中:C组、H组、E组、HE组Erk1/2表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);H组、HE组p-Erk1/2表达水平分别高于C组、E组(P<0.05).结论 MRC-5细胞分泌的HGF能够在裸鼠体内诱导敏感NSCLC细胞PC-9、H292对厄洛替尼耐药,HGF通过激活c-Met及其下游通道蛋白的磷酸化可能是不同基因型NSCLC细胞对厄洛替尼耐药的重要机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朴红梅	延边大学附属医院呼吸内科	13	39	3.0	6.0
2	崔青松	延边大学附属医院呼吸内科	8	3	1.0	1.0
3	崔晶刚	延边大学附属医院呼吸内科	1	2	1.0	1.0
4	王富佳	延边大学附属医院呼吸内科	1	2	1.0	1.0
5	安昌善	延边大学附属医院呼吸内科	1	2	1.0	1.0