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摘要:
目的 探究长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)靶向miR-21的作用对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨细胞凋亡及炎症反应的影响及其作用机制.方法 将细胞分为cTRL组、IL-1β组、LV-MEG3组、miR-21 mimic组和LV-MEG3+mimic组,用IL-1β处理软骨细胞后,加入对应的慢病毒或miRNA mimic处理细胞.RT-PCR检测MEG3、miR-21、基质金属蛋白酶13(MMP-13)、Ⅱ型胶原蛋白(Collagen Ⅱ)、聚蛋白聚糖(Aggrecan)基因表达水平,Hoechst检测细胞凋亡,Western blot检测活化半胱天冬酶3(cl-Caspase-3)、cl-Caspase-9、MMP-13、Collagen Ⅱ、Aggrecan蛋白表达水平和p65、信号传导及转录激活因子3(STAT3)磷酸化比率,试剂盒检测丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、肿瘤坏死因子o(TNF-α)、IL-6、IL-10水平,免疫荧光检测p65的核定位情况.结果 与cTRL组比较,IL-1β组miR-21表达,细胞凋亡率,MMP-13基因表达,cl-Caspase-3、cl-Caspase-9、MMP-13蛋白表达,MDA、LDH、TNF-α、IL-6水平,p65和STAT3磷酸化比率,p65核内信号水平升高,MEG3表达,Collagen Ⅱ、Aggrecan基因和蛋白表达,SOD、GSH、IL-10水平降低;与IL-1β组比较,LV-MEG3组miR-21表达,细胞凋亡率,MMP-13基因表达,cl-Caspase-3、cl-Caspase-9、MMP-13蛋白表达,MDA、LDH、TNF-α、IL-6水平,p65和STAT3磷酸化比率,p65核内信号水平降低,MEG3表达水平,Collagen Ⅱ、Aggrecan基因和蛋白表达水平,SOD、GSH、IL-10水平升高;miR-21 mimic组各项检测指标的变化与LV-MEG3组相反;与miR-21 mimic组比较,LV-MEG3+ mimic组miR-21表达,细胞凋亡率,MMP-13基因表达,MMP-13、cl-Caspase-3、cl-Caspase-9蛋白表达,MDA、LDH、TNF-α、IL-6水平,p65和STAT3磷酸化比率,p65核内信号水平降低,MEG3表达水平,Collagen Ⅱ、Aggrecan基因和蛋白表达,SOD、GSH、IL-10水平升高.结论 MEG3可下调miR-21表达,从而抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,缓解炎症反应,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路激活有关.
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文献信息
篇名 长链非编码RNA MEG3靶向下调miR-21对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎症反应的影响
来源期刊 中国骨质疏松杂志 学科 医学
关键词 骨关节炎 软骨细胞 MEG3 miR-21
年,卷(期) 2020,(4) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 515-523
页数 9页 分类号 R363
字数 5077字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1006-7108.2020.04.010
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 丁童 新乡医学院附属中心医院创伤外科 1 0 0.0 0.0
2 周彦鹏 新乡医学院附属中心医院创伤外科 1 0 0.0 0.0
3 冯立平 新乡医学院附属中心医院创伤外科 1 0 0.0 0.0
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中国骨质疏松杂志
月刊
1006-7108
11-3701/R
大16开
北京望京西园三区325楼丙单元601
82-198
1995
chi
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