N-乙酰神经氨酸醛缩酶的固定化及固定化酶性质研究

• 作者: 吴金勇 姚建铭 朱薇薇 王惠兰 袁丽霞 陈祥松
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: N-乙酰神经氨酸醛缩酶 LX-1000HFA氨基树脂 固定化 酶学性质 N-乙酰神经氨酸
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 165-173
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-1027

摘要

使用LX-1000HFA氨基树脂对N-乙酰神经氨酸醛缩酶(NAL)进行固定化,并对游离酶与固定化酶的酶学性质及稳定性进行了对比研究.结果显示,最佳固定化条件为载体投放量5.0 g,固定化时间12 h,缓冲液浓度1.0 mol/L,pH7.5,温度25℃.在此条件下制备的固定化NAL活力最高,比酶活可达200 U/g湿载体.与游离酶相比,最适反应温度提高了5℃,最适反应pH没有变化,温度和pH耐受性明显提升.同时固定化酶储存稳定性和操作稳定性也显著增强,在4℃条件下储存10 d后其酶活仅损失6％,重复使用10次后仍保持初始酶活的80％.因此,该固定化酶具有良好的温度稳定性、pH稳定性、储存稳定性和操作稳定性,为酶法工业化生产N-乙酰神经氨酸研究提供了理论依据.