LV-ERK1-RNAi转染人非小细胞肺癌细胞的ERK1/2、DNA甲基转移酶1表达观察

• 作者: 刘俊 周华富 孙宇 张恒 陈尚威
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞外信号调节激酶1基因 RNA干扰技术 慢病毒载体 非小细胞肺癌 NCI-H1299细胞 细胞外信号调节激酶1 DNA甲基转移酶1 磷酸化ERK1
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 字数: 3070字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2020.03.002

摘要

目的 观察细胞外信号调节激酶1基因RNA干扰慢病毒载体(LV-ERK1-RNAi)转染后人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞NCI-H1299中细胞外信号调节激酶1(ERK1)、ERK2、DNA甲基转移酶1(DNMT1)mRNA及ERK1、磷酸化ERK1(p-ERK1)、DNMT1蛋白表达情况.方法 体外培养NCI-H1299细胞,将细胞随机分为3组,KD组和NC组细胞分别转染LV-ERK1-RNAi、阴性对照病毒,CON组不作处理.转染72 h后,采用荧光显微镜观察细胞荧光率,实时荧光定量基因扩增法检测细胞中ERK1/2、DNMT1 mRNA,蛋白免疫印迹法检测细胞中ERK1、p-ERK1、DNMT1蛋白.结果 空白对照组细胞无绿色荧光蛋白表达,阴性对照病毒组、LV-ERK1-RNAi组转染效率达80％以上.与NC组、CON组比较,KD组ERK1、DNMT1 mRNA及ERK1、p-ERK1、DNMT1蛋白表达下降(P均<0.05).结论 LV-ERK1-RNAi转染后NCI-H1299细胞ERK1、DNMT1 mRNA及ERK1、p-ERK1、DNMT1蛋白表达降低,ERK2表达正常,表明LV-ERK1-RNAi特异敲低ERK1而调控DNMT1的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周华富		111	265	7.0	8.0
2	刘俊		14	29	3.0	4.0
3	孙宇	广西医科大学第二附属医院	24	67	5.0	6.0
4	张恒		1	0	0.0	0.0
5	陈尚威		1	0	0.0	0.0