犬瘟热病毒实时荧光RT-RPA检测方法的建立及应用

• 作者: 傅彩霞 刘海莹 周德刚 张启龙 张玮 王林 程敏姮 郑雪莹 高晓龙
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 犬瘟热病毒 实时荧光 反转录-重组酶聚合酶等温扩增 检测
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 19-23
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5
• 语种: 中文

摘要

为建立犬瘟热病毒(CDV)临床快速检测方法,针对CDV保守N基因依据重组酶聚合酶等温扩增(RPA)引物设计原理进行RPA引物探针设计,通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验和临床样品检测,建立了CDV实时荧光RT-RPA检测方法.结果显示,反应体系中M-MLV反转录酶最适浓度为4 U/μL,所建CDV实时荧光RT-RPA检测方法特异性较好,敏感性最低可检测到5.68×102 copies/μL,高于国标RT-PCR(GB/T 27532-2011)检测方法.建立的CDV实时荧光RT-RPA检测方法具有较高的敏感性和特异性、操作简便、20 min内判定结果,可用于临床犬瘟热快速诊断,对犬瘟热的防控具有重要意义.