DH-332通过TRIM40/Raf-1/ERK1/2轴在胃癌中的作用和机制研究

• 作者: 何文婷 帕提玛·阿布力米提 张洪亮 李南 赵俊涛 轩艳红
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 DH-332 TRIM40 Raf-1/ERK1/2 糖酵解 增殖和侵袭迁移
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1420-1428
• 页数: 9页
• 分类号: R735.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16190/j.cnki.45-1211/r.2020.08.005

摘要

目的:探讨DH-332通过TRIM40/Raf-1/ERK 1/2调节胃癌(GC)的发生以及机制研究.方法:首先,检测了新疆医科大学第四附属医院30例GC患者及相应的癌旁组织和GCMKN-45细胞及正常胃上皮GES-1细胞中TRIM40 mRNA及其蛋白的表达水平;然后构建了干扰TRIM40的MKN-45细胞系,将DH-332处理MKN-45细胞或干扰MKN-45细胞的TRIM40后,通过qPCR、Western blotting检测TRIM40、Raf-1、ERK1/2和细胞周期关键蛋白CyclinD1、CDK2及糖酵解相关蛋白GLUT1、PKM2、HKII、LDHA mRNA及其蛋白的表达,通过糖酵解相关试剂盒检测细胞内葡萄糖、乳酸及ATP的含量,CCK-8检测MKN-45细胞的增殖能力,最后通过集落形成、TranswellTM和划痕实验检测MKN-45细胞的侵袭和迁移能力.结果:与相邻的癌旁组织和GES-1细胞相比,TRIM40 mRNA和蛋白在GC组织及GC细胞中低表达;与MKN-45细胞相比,DH-332能够促进MKN-45细胞TRIM40 mRNA及其蛋白的表达,抑制Raf-1、CyclinD1、CDK、GLUT1、PKM2、HKII、LDHA mRNA及其蛋白的表达,抑制ERK1/2蛋白的表达;与TRIM40-shN对照组相比,干扰TRIM40后,Raf-1、CyclinD1、CDK、GLUT1、PKM2、HKII、LDHA mRNA及其蛋白的表达升高,ERK1/2蛋白的表达升高;与MKN-45细胞相比,DH-332能够抑制MKN-45细胞葡萄糖的摄取、乳酸和ATP的生成,抑制其增殖和侵袭迁移能力;与TRIM40-shN对照组相比,干扰TRIM40后,MKN-45细胞葡萄糖的摄取、乳酸和ATP的生成增加,增殖和侵袭迁移能力也升高.结论:DH-332通过促进GC细胞中TRIM40的表达,抑制Raf-1/ERK1/2通路的发生,并且抑制糖酵解的发生及细胞的增殖和侵袭迁移,减缓GC的进展.