宿主细胞蛋白HSPA2与TGEV Nsp2的相互作用及其对病毒复制的影响

• 作者: 王亚楠 韩露露 孙傲颖 姜艳平 崔文 乔薪瑗 唐丽杰 徐义刚 李一经 王丽
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus TGEV) 热休克蛋白70-2(HSPA2) 蛋白互作 病毒复制 免疫共沉淀(Co-IP) 真核表达
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 1-6,14,175
• 页数: 8页
• 分类号: S852.65|S858.28
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2020.02.0030

摘要

为了探究猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)非结构蛋白2(Nsp2)与宿主细胞热休克蛋白70-2(HSPA2)的相互作用,以及HSPA2表达对TGEV复制的影响,试验利用RT-PCR方法获得猪源HSPA2基因并构建其真核表达载体pCMV-Myc-HSPA2,通过Western-blot和间接免疫荧光试验检测真核表达载体pCMV-Myc-HSPA2在IPEC-J2细胞中的表达情况.利用免疫共沉淀(Co-IP)和共定位试验进一步验证TGEV Nsp2和宿主细胞蛋白HSPA2之间是否存在相互作用,利用基因过表达技术在IPEC-J2细胞中过表达HSPA2后接种TGEV,分别测定接种后36,48小时时病毒TCID50.结果 表明:真核表达载体pCMV-Myc-HSPA2能够在IPEC-J2细胞中成功表达,HSPA2与Nsp2之间存在相互作用,并且HSPA2表达量升高后TGEV的TCID50略有升高.说明宿主细胞蛋白HSPA2与TGEV Nsp2之间存在相互作用,且HSPA2的表达对TGEV复制具有一定促进作用.