高致病性PRRSV Nsp2基因RNA干扰对病毒复制的影响

• 作者: 刘准 师新川 武华 温永俊 王凤雪 胡嘉欣
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 非结构蛋白2 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 132-137
• 分类号: S852.65
• 字数: 3928字
• 语种: 中文

摘要

旨在构建针对猪繁殖与呼吸综合征病毒( PRRSV) TJ株Nsp2基因的siRNA的表达载体,研究Nsp2基因的表达抑制对PRRSV复制的影响.设计并合成针对PRRSV TJ株Nsp2基因的3对优势小发卡RNA( shRNA),连接到pRNAT-U6.1/Neo,构建shRNA表达裁体,将鉴定正确的栽体质粒转染Marc-145细胞,6h后接毒,每日观察CPE；在接毒PRRSV TJ株后不同时间点取上清样品,测定样品TCID50；并以β-actin为内参,RT-PCR对PRRSV Nsp2 mRNA进行半定量.结果表明,选取的3条Nsp2基因的优势siRNA均能够抑制PRRSV TJ株在Marc-145细胞上增殖,其中shRNA栽体S-1和S-2抑制效果明显,与空载体相比较差异极显著.本研究构建的PRRSV Nsp2基因特异性shRNA栽体能够有效抑制PRRSV的复制,可使病毒滴度TCID50最多降低103.38.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	温永俊	中国农业科学院特产研究所	25	169	7.0	11.0
2	武华	中国农业科学院特产研究所	24	125	5.0	10.0
3	王凤雪	中国农业科学院特产研究所	24	128	7.0	9.0
4	胡嘉欣	中国农业科学院特产研究所	3	21	3.0	3.0
5	师新川	中国农业科学院特产研究所	4	25	3.0	4.0
6	刘准	中国农业科学院特产研究所	3	11	2.0	3.0