高致病性PRRSV Nsp2变异株Power SYBR Green real time RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 徐志文 林华 郭万柱 郭杨 陈世界 颜其贵
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 高致病性PRRSV Nsp2变异株 Power SYBR Green实时荧光反转录聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 410-415
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 4502字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.05.007

摘要

根据高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2变异株Nsp2基因保守区的核苷酸序列设计合成了1对引物,建立了Power SYBR Green模式的实时荧光定量RT-PCR方法,用于检测高致病性PRRSV Nsp2变异株.以pMD-Nsp2质粒为阳性对照制作标准曲线,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行评价.结果显示,该方法只能检测到高致病性PRRSV Nsp2变异株的特异性扩增信号;检测线性范围广,在模板浓度为3.15×109～3.15×100copies/uL具有良好的线性关系,相关系数(r2)为0.998;最低检测限为3.15 copies/uL.对25份疑似高致病性PRRS猪病料的检测结果显示,该方法与病毒分离的符合率为100%.表明,建立的Nsp2-Power SYBR Green RT-PCR方法具有良好的特异性、敏感性和重复性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭万柱	四川农业大学动物生物技术中心	166	1465	21.0	28.0
2	徐志文	四川农业大学动物生物技术中心	184	909	15.0	20.0
3	陈世界		16	170	6.0	12.0
4	颜其贵	四川农业大学动物生物技术中心	107	551	11.0	17.0
5	郭杨	四川农业大学动物生物技术中心	5	161	4.0	5.0
9	林华	四川农业大学动物生物技术中心	15	36	4.0	5.0