牡荆素调控M1/M2型巨噬细胞极化抗肺腺癌转移的作用研究

• 作者: 殷亦男 毕凌 焦丽静 王程燕 许玲 赵蓓
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 牡荆素 巨噬细胞 侵袭 肺腺癌
• 年，卷（期）: 2020,（20）
• 所属期刊栏目: 中医中药与免疫
• 页码范围: 2456-2461
• 页数: 6页
• 分类号: Q291
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2020.20.006

摘要

目的:探讨牡荆素对M1/M2型巨噬细胞的调控作用和机制.方法:利用脂多糖(LPS)和IL-4诱导M1/M2型鼠源巨噬细胞RAW264.7,通过CCK8法检测不同浓度牡荆素对RAW264.7细胞的活力影响来确定牡荆素的最适浓度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time RT-PCR)法检测牡荆素对巨噬细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-1β、精氨酸酶1(Arg-1)、甘露糖受体(MR)基因表达的影响;通过Griess反应法检测牡荆素对巨噬细胞上清液中NO含量的影响;Transwell小室迁移实验检测由IL-4诱导的M2型巨噬细胞对非小细胞肺癌A549的体外迁移及牡荆素干预的影响;流式实验检测牡荆素对M2型巨噬细胞表型CD206的影响.Western blot检测磷酸化信号传导及转录激活因子3表达.结果:牡荆素在25、50、100 mol/L浓度时对小鼠巨噬细胞无明显细胞毒性,确定25、50、100 μmol/L浓度进行后续实验.RT-PCR实验表明牡荆素呈剂量依赖性抑制M1表型标记物iNOS和IL-1β基因的mRNA表达,抑制M2型巨噬细胞表型中Arg-1和MR基因的mRNA表达.Griess反应法表明牡荆素呈浓度依赖抑制巨噬细胞M1表型中NO含量,同时抑制由M2型巨噬细胞诱发肺腺癌A549细胞的迁移能力的加剧.流式细胞术结果显示牡荆素能够抑制M2表型CD206的表达且呈浓度依赖性.Western blot结果显示牡荆素能够降低p-STAT3蛋白水平.结论:牡荆素通过调控STAT信号通路,调节巨噬细胞M1/M2的表型极化和标志性产物的表达,抑制巨噬细胞向M2极化,从而降低肺腺癌细胞A549细胞体外迁移力.