佛手柑内酯通过PI3K/Akt信号通路诱导人肝癌细胞HepG2和Hep3B凋亡的机制

• 作者: 王超 田男 范春雷 赵丽萍
• 来源期刊: 中国实验方剂学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 佛手柑内酯 肝细胞癌 磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt) 凋亡 信号通路
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 73-78
• 页数: 6页
• 分类号: R22|R242|R2-031|R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200623

摘要

目的:探究佛手柑内酯通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路诱导人肝癌细胞HepG2和Hep3B凋亡的机制.方法:设立佛手柑内酯(5,50,200 μmol·L-1)组和空白组;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测佛手柑内酯作用HepG2和Hep3B细胞24,48 h细胞增殖;磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染检测细胞凋亡;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western bolt)检测相关mRNA和蛋白的表达含量;进行平板细胞克隆形成实验评价各组HepG2和Hep3B细胞的克隆形成率与效果.结果:MTT实验表明,佛手柑内酯能明显抑制HepG2和Hep3B细胞的增殖活性,且呈浓度依赖性;流式细胞仪分析结果表明,佛手柑内酯200 μmol· L-1组作用于HepG2和Hep3B细胞48 h,有明显促凋亡作用(P＜0.05);Western blot结果显示,佛手柑内酯可以上调半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3,Caspase-8蛋白表达量(P＜0.05),并且下调B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),PI3K蛋白表达(P＜0.05);Real-time PCR显示PI3K,Akt mRNA相对表达量降低(P＜0.05);平板细胞克隆形成实验的结果显示,随着佛手柑内酯浓度的增加,各组细胞克隆形成率呈递减趋势,且佛手柑内酯200 μmol·L-组作用降低明显(P＜0.05).结论:佛手柑内酯对人肝癌细胞HepG2和Hep3B的增殖存在抑制作用,其可能是通过PI3K/Akt信号通路诱导HepG2和Hep3B细胞的凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范春雷		61	431	13.0	18.0
2	田男		25	33	3.0	4.0
3	王超		24	152	7.0	12.0
4	赵丽萍		3	13	1.0	3.0