犬瘟热病毒融合蛋白的真核细胞表达及鉴定

• 作者: 张同存 校海霞 白桂杰
• 来源期刊: 今日畜牧兽医
• 关键词: 犬瘟热病毒 融合蛋白 抗原性 表达 ELISA
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 5-7
• 页数: 3页
• 字数: 3455字
• 语种: 中文

摘要

目的:通过293T真核细胞表达犬瘟热病毒融合蛋白,并鉴定其抗原性.方法:利用PCR方法扩增犬瘟热病毒(Onderstepoort株)的融合蛋白胞外段,在C末端引入氨基酸突变和His标签,插入pFuse载体,构建重组质粒pFuse-CDV-sF-ecto.将重组质粒转染293T细胞,72～96h后收上清,通过镍离子亲和层析和凝胶层析纯化目的蛋白,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定sF-ecto蛋白抗原性.结果:细胞上清先经His-TrapTM富集,而后用Superdex 200 10/300GL纯化,出峰体积为8.43 mL,由出峰位置判断表达的CDV-sF-ecto蛋白为多聚体.ELISA检测发现CDV-sF-ecto与商业化犬瘟热病毒单克隆抗体有较高反应值.本研究成功表达了犬瘟热病毒融合蛋白的胞外段,并证明该蛋白对犬瘟热病毒特异性单克隆抗体有较高的结合活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	校海霞	中国科学院天津工业生物技术研究所	9	49	3.0	7.0
2	张同存	天津科技大学生物工程学院	31	69	5.0	6.0
3	白桂杰	天津科技大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0