MALAT1通过调控miR-146a减轻关节软骨细胞凋亡和基质降解的研究

• 作者: 宋超 王冶 蒲劲松 陈林 郭浩然 崔瀚文
• 来源期刊: 现代免疫学
• 关键词: 骨关节炎 微小RNA-146a 转移相关肺腺癌转录本1 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 111-117
• 页数: 7页
• 分类号: R816.8
• 语种: 中文

摘要

为探究转移相关肺腺癌转录本 1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)对 miR-146a 的调控作用及其对关节软骨细胞凋亡和基质降解的影响,采用RT-PCR检测临床软骨组织中miR-146a和MALAT1的表达,分析其变化的相关性;双荧光素酶报告基因试验检测miR-146a和MALAT1的靶向作用关系;之后分组并转染miR-146a mimics或MALAT1重组过表达载体,经过IL-1β处理,采用RT-PCR检测miR-146a表达,CCK-8检测细胞增殖水平,Hoechst检测细胞凋亡水平,Western blotting检测活化型半胱天冬酶3(cleaved caspase 3,cl-CASP3)、B细胞淋巴瘤因子2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关 X 蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、基质金属蛋白酶 13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)、带有血小板凝血酶敏感蛋白结构域的解聚素金属蛋白酶5(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 5,ADAMTS-5)、Ⅱ型胶原蛋白(collagen Ⅱ,COL2)、聚蛋白聚糖蛋白水平.结果显示,相比于普通关节软骨组织,骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨组织MALAT1相对表达水平升高(P＜0.05),miR-146a相对表达水平降低(P＜0.05),MALAT1与miR-146a表达呈负相关(r=-0.907 8,P＜0.001);双荧光素酶报告基因试验显示,miR-146a和MALAT1存在靶向作用关系;相比于IL-1β组,miR-146a组细胞增殖水平降低,细胞凋亡率及cl-CASP3、Bax相对蛋白表达水平升高,Bcl-2相对蛋白表达水平降低,同时MMP-13和ADAMTS-5相对蛋白表达水平升高,COL2和聚蛋白聚糖相对蛋白表达水平降低(均P＜0.01);MALAT1过表达可显著降低miR-146a的表达水平,提高细胞增殖活性并抑制其凋亡,同时降低MMP-13和ADAMTS-5相对蛋白表达水平,提升COL2和聚蛋白聚糖相对蛋白表达水平(均P＜0.01).该研究提示,MALAT1可通过靶向作用于miR-146a发挥对软骨细胞的抗凋亡作用.