阿魏酸对RAW264.7源性泡沫细胞脂代谢及炎症反应的影响

• 作者: 赵立凤 罗瑞熙 许滔 俞琦 李帅帅 于红红 田维毅
• 来源期刊: 贵州中医药大学学报
• 关键词: 阿魏酸 泡沫细胞 动脉粥样硬化 脂代谢 PPARγ
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 19-25,32
• 页数: 8页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.16588/j.cnki.issn2096-8426.2021.02.005

摘要

目的:通过体外细胞实验研究阿魏酸对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的泡沫化巨噬细胞脂代谢及炎症反应的影响,并通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)-炎症通路探讨阿魏酸抗动脉粥样硬化(AS)的分子作用机制.方法:ox-LDL诱导RAW264.7源性巨噬细胞形成泡沫细胞,CCK8法观察阿魏酸对泡沫细胞模型细胞活性的干预作用;油红O染色法鉴定细胞泡沫化及阿魏酸对脂质沉积的干预作用;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定细胞PPARγ、TNF-α的蛋白表达水平.结果:CCK8结果显示,ox-LDL呈浓度依赖性诱导细胞损伤;阿魏酸25μM以下对RAW264.7细胞无毒性作用,阿魏酸12.5 μM、25μM浓度对ox-LDL诱导的细胞活性下降具有保护作用.油红O染色显示,ox-LDL诱导后细胞内可见红色脂滴,提示泡沫细胞模型制备成功,阿魏酸干预后脂质沉积减少.ELISA结果显示,与正常组比较,ox-LDL组细胞培养上清IL-10浓度降低,IL-1β、TNF-α浓度升高,阿魏酸干预后IL-10浓度升高,IL-1β、TNF-α浓度降低(P＜0.05,P＜0.01);Western Blot结果显示,与模型组相比较,阿魏酸干预组PPARγ蛋白表达水平升高,TNF-α表达下降,PPARγ抑制剂的加入可削弱阿魏酸的干预作用(P＜0.05,P＜0.01).结论:阿魏酸可通过激活PPARγ改善ox-LDL诱导的RAW264.7源性泡沫细胞脂质沉积,改善炎症反应,恢复巨噬细胞功能,这可能是以阿魏酸为主要成分中药及复方治疗AS的分子机制之一.