过表达蛋白合成与分泌相关蛋白提高CHO细胞anti-hLAG3产量

• 作者: 刘立苹 喻长远 许立达
• 来源期刊: 北京化工大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: XBP1s CHO细胞 细胞工程 瞬时表达 anti-hLAG3
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 生物科技与环境工程
• 页码范围: 41-48
• 页数: 8页
• 分类号: R979.5|Q812
• 语种: 中文
• DOI: 10.13543/j.bhxbzr.2021.01.006

摘要

对比研究了过表达蛋白合成与分泌途径中的20种蛋白对瞬时表达细胞(ExpiCHO-S细胞)表达anti-hLAG3产量的影响,考察了转录因子XBP1s对ExpiCHO-S细胞生长、抗体产量和抗体亲和力的影响.结果表明,当所研究蛋白的表达质粒与anti-hLAG3质粒以1:4的质量比共转染时,XBP1s能够使抗体产量提高约30％,GADD34、NFKBIz、CERT、C/EBPα和mTOR的过表达则会明显降低抗体产量,其他14种蛋白对抗体产量的影响较小.随着XBP1s共转染比例的增加,其对anti-hLAG3生产的促进作用增强,当共转染比例提高到60％时,相对于共转染比例为60％的EGFP,可使转染后168 h的抗体产量提高到2.1倍.此外,XBP1s的过表达对活细胞密度和细胞活率以及抗体亲和力的影响均较小.以上结果表明XBP1s可作为细胞工程的一个有效靶标用于提高CHO细胞重组蛋白的生产性能.