基于ipH基因的志贺菌LAMP检测方法的建立及应用

• 作者: 文英 刘永生
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 环介导等温扩增法 志贺菌 ipaH基因 检测
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 畜牧·动物医学·蚕·蜂
• 页码范围: 104-110
• 页数: 7页
• 分类号: S858.2
• 语种: 中文

摘要

为建立一种快速、特异、敏感的志贺菌环介导等温扩增(LAMP)检测方法,试验针对志贺菌属侵袭性质粒抗原H基因(invasive plasmid,ipaH)设计一套特异性引物,条件优化及特异性和敏感性验证后建立了该菌的LAMP检测方法,并应用于临床样本的检测.结果显示,62℃恒温扩增1h能得到明显的扩增产物,除志贺菌标准菌株扩增结果为阳性外,沙门菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和阴性对照均为阴性,检测限值达到120 fg/μL.利用建立的方法检测了20株疑似菌株和38份粪样样品,结果显示20株疑似菌和27份粪样样品为阳性,阳性率分别为100％和71.05％,说明建立的LAMP检测法具有良好的特异性和敏感性,在粪便等临床样本中志贺菌的检测与鉴定方面具有优势和应用前景.