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白粉病菌侵染条件下小麦酵母双杂交文库的构建及可用性检测
白粉病菌侵染条件下小麦酵母双杂交文库的构建及可用性检测
作者:
王巧慧
谷建华
郭欢
吕士凯
吉万全
张宏
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
白粉菌
小麦
cDNA文库
酵母双杂交
HSP40-70
摘要:
为解析白粉病菌侵染小麦以及小麦防御的分子机制,以抗白粉病种质N9134为材料,剪取白粉病菌(Blumeria graminis f.sp.tritici,Bgt)接种48 h后的叶片,提取总RNA,利用SMART技术进行反转录合成双链cDNA(ds-cDNA),并进行均一化处理和SfiI酶切处理,处理后的ds-cDNA分别连接pGADT7-SfiI三框载体,将连接产物转化至感受态细胞HST08中构建文库.通过滴度测定和PCR鉴定其库容量和基因重组率,最后收集细菌并提取质粒.经鉴定,该文库库容量大于1.0×106 cfu·mL-1,插入片段主要分布在400~2 000 bp之间,重组率为100%,冗余度为3%.利用酵母双杂交系统筛选cDNA文库,获得2个与热休克蛋白HSP40-70互作的蛋白质,分别为DnaJ类蛋白(DnaJ-like)和E3泛素蛋白连接酶AIP2(AIP).综上表明,文库构建质量较好,为后续筛选抗逆关键基因奠定了基础.
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水稻
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cDNA文库
酵母双杂交
内容分析
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内容分析
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文献信息
篇名
白粉病菌侵染条件下小麦酵母双杂交文库的构建及可用性检测
来源期刊
麦类作物学报
学科
关键词
白粉菌
小麦
cDNA文库
酵母双杂交
HSP40-70
年,卷(期)
2021,(2)
所属期刊栏目
遗传育种|Genetics & Breeding
研究方向
页码范围
127-133
页数
7页
分类号
S512.1|S330
字数
语种
中文
DOI
10.7606/j.issn.1009-1041.2021.02.01
五维指标
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小麦
cDNA文库
酵母双杂交
HSP40-70
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
麦类作物学报
主办单位:
西北农林科技大学
中国作物学会
国家小麦工程技术研究中心
出版周期:
月刊
ISSN:
1009-1041
CN:
61-1359/S
开本:
大16开
出版地:
陕西杨陵邰城路3号
邮发代号:
52-66
创刊时间:
1981
语种:
chi
出版文献量(篇)
4419
总下载数(次)
6
总被引数(次)
56317
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