西格列汀通过阻断核因子-κB信号通路抑制脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应

• 作者: 刘相 康文燕 商玲玲 葛少华
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 关键词: 西格列汀 脂多糖 核因子-κB 炎症 人牙龈成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 153-163
• 页数: 11页
• 分类号: R988.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.7518/hxkq.2021.02.005

摘要

目的 明确西格列汀对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(HGF)炎症反应的影响,并探讨其发挥作用的分子学机制,为未来西格列汀在牙周炎治疗中的应用提供初步的实验依据.方法 收集临床患者健康牙龈组织标本,利用酶消化法分离培养HGF并进行细胞来源鉴定;采用细胞增殖-毒性检测试剂盒检测LPS和西格列汀与HGF共培养24、48 h细胞增殖变化;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测炎性细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-8、趋化因子配体2(CCL2)、超氧化物歧化酶2(SOD2)的基因表达水平;酶联免疫吸附实验检测细胞培养上清液中IL-6、IL-8和CCL2的蛋白表达水平;应用蛋白免疫印迹法检测核因子-κB(NF-κB)信号通路的激活情况,通过qRT-PCR验证NF-κB通路抑制剂BAY11-7082对LPS诱导的HGF炎症细胞因子基因表达水平的影响.结果 低浓度的西格列汀(0.1、0.25、0.5μmol·L-1)作用24、48 h对HGF的生长无影响,而高浓度西格列汀(5～1000μmol·L-1)明显抑制了细胞增殖.西格列汀浓度依赖性抑制5μg·mL-1 LPS诱导的HGF中IL-6、IL-8、CCL2和SOD2的基因表达水平.此外,西格列汀显著抑制LPS诱导的IL-6、IL-8和CCL2蛋白表达水平.蛋白免疫印迹结果表明:0.5μmol·L-1西格列汀显著性抑制了LPS诱导的NF-κB信号通路激活,qRT-PCR结果表明0.5μmol·L-1西格列汀与5μmol·L-1BAY11-7082均显著抑制了LPS诱导的IL-6、IL-8、CCL2和SOD2的基因表达水平.结论 西格列汀通过阻断NF-κB信号通路的激活来抑制LPS诱导的HGF炎症反应.