家蚕G4结合蛋白BmLARK的重组表达和结晶

• 作者: 叶若琦 牛康康 韩书婧 汪颖 李琼 周丛照 冯启理
• 来源期刊: 蚕业科学
• 关键词: 家蚕 G-四链体 转录因子 BmLARK 晶体
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告|Research Papers
• 页码范围: 211-221
• 页数: 11页
• 分类号: S881.2+4
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2021.03.002

摘要

细胞内DNA通常以B型右手双螺旋结构的形式存在.但当一段DNA富含连续出现的鸟嘌呤(G)时,这段DNA序列有可能折叠为四链体(G-quadruplex,G4)结构.G4结构广泛分布于生物的基因组中,参与基因的转录调控、DNA复制、端粒保护和蛋白质翻译等重要的生物学过程.我们前期在家蚕转录因子BmPOUM2基因的启动子区鉴定到一个G4结构,并筛选到一个与该结构特异结合的蛋白BmLARK.在本研究中,为了分析BmLARK与G4结构结合的分子机制,我们首先对编码BmLARK全长及其多个截短的DNA序列进行了分子克隆,利用原核表达系统对BmLARK和截短蛋白进行了重组表达和纯化,获得的重组蛋白在体外可与BmPOUM2-G4结构结合;然后运用悬滴蒸汽扩散法对该蛋白质-DNA结合复合物进行结晶,初步获得了晶体.试验结果为进一步探索获得和解析BmLARK-G4复合物的晶体结构提供了线索.