普罗布考经Nrf2/Gpx4途径抑制铁死亡保护H9C2心肌细胞

• 作者: 钟桂玲 李文祥 王贺 陈丰 李仕来 朱继金
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 关键词: 普罗布考 H9C2心肌细胞 铁死亡 核因子E2相关因子2 谷胱甘肽过氧化物酶4
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 462-467
• 页数: 6页
• 分类号: R541.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.16190/j.cnki.45-1211/r.2021.03.007

摘要

目的:研究普罗布考(probucol)对RSL3(一种铁死亡诱导剂)诱导的心肌细胞铁死亡的影响并探讨其可能机制.方法:使用大鼠胚胎心肌细胞H9C2进行体外实验,细胞经浓度梯度的RSL3处理12 h,采用CCK8法检测心肌细胞的存活率.随后细胞用RSL3(1.406μmol/L)与浓度梯度的probucol共处理12 h,测得probucol的最佳干预浓度.然后将在对数生长期的细胞随机分成4组:对照组(DMSO组)、RSL3(1.406μmol/L)组、RSL3(1.406μmol/L)+probucol(50μmol/L)组、probucol(50μmol/L)组.光镜下观察细胞形态,Western blotting检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)蛋白的表达以及流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)的浓度.结果:H9C2心肌细胞经probucol治疗后细胞活性增强、形态改善.probucol剂量依赖性的抑制RSL3诱导的H9C2心肌细胞的铁死亡;RSL3的IC50为1.406μmol/L,probucol的最佳干预浓度为50μmol/L.DMSO组细胞形态呈梭型,长势良好,贴壁性好,折光度强;RSL3组的细胞皱缩、贴壁性差,折光度减弱;RSL3+probucol组细胞状态明显改善,与DMSO组细胞形态基本相似;与DMSO组相比,RSL3组细胞内ROS浓度升高,Nrf2及Gpx4蛋白的表达降低(P<0.05);与RSL3组相比,RSL3+probucol组Nrf2、Gpx4蛋白的表达水平显著升高,细胞内ROS浓度明显降低(P<0.05).结论:probucol降低细胞内氧化应激抑制RSL3诱导的心肌细胞铁死亡,其机制可能为通过升高Nrf2蛋白和Gpx4蛋白的表达水平.