兽用疫苗中BVDV、PCV2和PPV污染三重荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 王艳 张秋蕾 王英华 俞向前 张强 文德亮
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 圆环病毒2型 细小病毒 实时荧光定量PCR 兽用疫苗
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 107-111
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.03.021

摘要

为建立可以快速同时检测兽用疫苗中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪细小病毒(PPV)3种病原的方法,通过研究比对BVDV 5'-UTR、PCV2 Rep以及PPV NS1基因序列,分别设计合成了3对引物和3条荧光探针,在优化反应条件和反应程序后,建立了一种可同时检测BVDV、PCV2以及PPV的三重荧光定量PCR方法,并对其敏感性、特异性进行了评估.结果显示,建立的三重荧光定量PCR方法灵敏度高,对3种病原核酸的最低检测限均为10 copies/μL;特异性强,与其他相关病原(猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、非洲猪瘟病毒)均无交叉反应.结果表明,本试验建立的三重荧光定量PCR适于疫苗中外源病毒的检测,可用于疫苗等生物制品质量把控.