circ-SFMBT2通过miR-224-5p/USP3轴对肝癌细胞增殖及迁移能力的影响

• 作者: 伍玉海 戴大飞 叶蕊 于北北 张书军 陈晓鹏
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 关键词: 肝肿瘤 癌 细胞增殖 细胞迁移分析 环状RNA SFMBT2基因 迁移
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 680-687
• 页数: 8页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.2096-8388.2021.06.010

摘要

目的 探讨环状RNA(circRNA)SFMBT2(circ-SFMBT2)通过miR-224-5p/USP3轴对肝癌细胞增殖及迁移能力的影响.方法 选取人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721、Huh-7、Sk-Hep-1及人正常肝细胞株LO2,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术检测circ-SFMBT2在5个细胞株中的表达,筛选出高表达circ-SFMBT2的人肝癌细胞株HepG2和正常肝细胞株LO2进行后续实验,采用原位杂交实验检测circ-SFMBT2在HepG2和LO2中的亚细胞定位;选取人肝癌细胞系HepG2传代培养,利用Lipofectamine 2000为转染试剂进行转染,分为circ-SFMBT2转染对照组(circ-SFMBT2 NC,NC组)、circ-SFMBT2干扰组(si-circ-SFMBT2组)、miR-224-5 p过表达组(mimic组)、USP3过表达组(si-circ-SFMBT2+USP3组)、miR-224-5 p干扰组(si-circ-SFMBT2+in-hibitor组)、miR-224-5p和USP3双过表达组(mimic+USP3组),分别采用细胞增殖(CCK-8)、克隆斑点形成及Transwell实验检测6组HepG2细胞增殖和迁移能力,采用双荧光素报告实验检测circ-SFMBT2、miR-224-5 p和USP3在HepG2细胞中彼此之间的靶向关系.结果 qRT-PCR结果显示与正常肝细胞LO2比较,circ-SFMBT2在4株肝癌细胞中高表达,差异有统计学意义(P<0.05);原位杂交实验证实circ-SFMBT2存在于细胞质中;细胞增殖(CCK-8、克隆斑点实验)和迁移实验(Transwell实验)检测发现,si-circ-SFMBT2组细胞增殖和迁移能力较NC组降低(P<0.05),mimic组增殖和迁移能力较si-circ-SFMBT2+inhibitor组降低(P<0.05),mimic+USP3组细胞增殖和迁移能力较mimic组升高(P<0.05);双荧光素实验证实miR-224-5p和USP3是circ-SFMBT2的下游靶点.结论 circ-SFMBT2通过miR-224-5 p/USP3轴参与了对肝癌细胞增殖和迁移的调控.