磷酸三苯酯对小鼠巨噬细胞Raw264.7的毒性及吞噬功能的影响

• 作者: 张梓涵 李丽 张文锋 张艳超 陈慧玲 石明
• 来源期刊: 癌变.畸变.突变
• 关键词: 磷酸三苯酯 巨噬细胞 吞噬作用 细胞毒性
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 269-275
• 页数: 7页
• 分类号: R114
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2021.04.005

摘要

目的:探讨磷酸三苯酯(TPHP)对巨噬细胞的毒性和机制,为评估TPHP暴露对免疫系统的影响和毒性风险提供参考.方法:分别用不同浓度(0、12.5、25、50、100、200、400μmol/L)的TPHP作用小鼠巨噬细胞系(Raw264.7)24、48或72 h后,采用CCK-8比色法和乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定细胞活性,采用流式细胞术检测巨噬细胞吞噬荧光微球的能力,采用Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)、丝/苏氨酸激酶(Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达水平的变化.结果:与对照组相比,随着TPHP浓度和作用时间的增加,细胞存活率逐渐降低,TPHP对Raw264.7细胞的毒性作用呈剂量依赖性(r=0.960,P<0.05)和时间依赖性(r=0.980,P<0.05);50～400μmol/L组细胞培养基中LDH水平均明显升高(P<0.05);当TPHP浓度为25和50μmol/L时,FITC-A+细胞的比例显著增加,说明细胞吞噬荧光微球的能力增加(P<0.05).Western blot法检测结果显示,与对照组相比,12.5～50μmol/L TPHP处理组TLR4的表达水平均升高(P<0.05或P<0.01),并可触发Akt、mTOR蛋白的磷酸化.结论:TPHP对Raw264.7细胞呈现明显的细胞毒性,导致巨噬细胞的吞噬功能增强,并促进了TLR4、Akt和mTOR蛋白的表达.