牙鲆头肾巨噬细胞的分离培养与鉴定

• 作者: 王宣刚 孔祥福 王欣桐 李恒顺 刘金相 王志刚 于海洋
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 关键词: 牙鲆 巨噬细胞 原代培养 鉴定
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 55-61
• 页数: 7页
• 分类号: S917.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20200402001

摘要

本研究使用密度梯度离心法从牙鲆(Paralichthys olivaceus)头肾中分离得到了巨噬细胞,通过差速贴壁法对获得的细胞进行纯化,后续经过优化培养条件和培养过程,采用L-15培养基(Gibco)、5％胎牛血清、1％青–链霉素、1％非必需氨基酸、30％L929细胞培养基在24℃、无CO2的条件下进行培养.显微镜观察及吉姆萨染色结果显示,贴壁细胞具备巨噬细胞形态特征,使用巨噬细胞特异性基因标记mpeg1基因对细胞进行鉴定,在分离得到的细胞中成功扩增出该基因.本研究为体外研究巨噬细胞功能、深入了解硬骨鱼先天性免疫奠定了基础.