微RNA-204靶向硫氧还蛋白相互作用蛋白对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用

• 作者: 王光权 李洪 潘在轩
• 来源期刊: 新乡医学院学报
• 关键词: 微RNA-204 硫氧还蛋白相互作用蛋白 脓毒症 急性肺损伤 氧化应激
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究|Basic Study
• 页码范围: 612-618
• 页数: 7页
• 分类号: R563
• 语种: 中文
• DOI: 10.7683/xxyxyxb.2021.07.003

摘要

目的 探讨微RNA-204(miR-204)靶向硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用.方法 选择无特定病原体级雄性Sprague Dawley大鼠48只,随机分为假手术组、模型组、阴性对照(NC)组、miR-204过表达(miR-204 agomir)组,每组12只.模型组、NC组、miR-204 agomir组大鼠通过盲肠结扎穿刺法建立脓毒症模型,假手术组大鼠仅开腹不做盲肠结扎及穿孔;脓毒症模型建立后,NC组、miR-204 agomir组大鼠分别通过尾静脉注射2μL agomir NC和2μL miR-204 agomir,模型组和假手术组大鼠注射等体积的生理盐水.于造模24 h后,断颈处死各组大鼠,取肺组织,采用光学显微镜观察各组大鼠肺组织病理变化,采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测各组大鼠肺组织中miR-204、TXNIP及硫氧还蛋白(Trx)mRNA表达水平;取HEK-293T细胞,采用双荧光素酶报告基因法检测试剂盒检测miR-204和TXNIP 3'UTR非编码区(3'UTR)靶向关系;Western blot法检测各组大鼠肺组织中TXNIP及Trx蛋白表达水平;酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平.结果 假手术组大鼠肺泡形态结构正常;模型组和NC组大鼠肺泡壁增厚,肺组织中出现大量炎症细胞浸润;与模型组和NC组比较,miR-204 agomir组大鼠肺组织炎症细胞浸润减少,肺泡损伤明显改善.模型组和NC组大鼠肺组织miR-204相对表达量显著低于假手术组(P<0.05);模型组与NC组大鼠肺组织中miR-204相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);miR-204 agomir组大鼠肺组织中miR-204相对表达量显著高于假手术组、模型组和NC组(P<0.05).模型组和NC组大鼠肺组织TXNIP mRNA和蛋白相对表达量显著高于假手术组(P<0.05);模型组与NC组大鼠肺组织TXNIP mRNA和蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);miR-204 agomir组大鼠肺组织TXNIP mRNA和蛋白相对表达量显著低于假手术组、模型组和NC组(P<0.05).miR-204 agomir+TXNIP 3'UTR-野生型组荧光素酶活性显著低于阴性对照+TXNIP 3'UTR-野生型组(P<0.05);miR-204 agomir+TXNIP 3'UTR-突变型组与阴性对照+TXNIP 3'UTR-突变型组荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05).模型组、NC组和miR-204 agomir组大鼠肺组织Trx mRNA和蛋白相对表达量显著低于假手术组(P<0.05);miR-204 agomir组大鼠肺组织Trx mRNA和蛋白相对表达量显著高于模型组和NC组(P<0.05);模型组与NC组大鼠肺组织中Trx mRNA和蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05).模型组、NC组和miR-204 agomir组大鼠肺组织中TNF-α、IL-6和MDA水平显著高于假手术组,SOD水平显著低于假手术组(P<0.05);miR-204 agomir组大鼠肺组织中TNF-α、IL-6和MDA水平显著低于模型组和NC组,SOD水平显著高于模型组和NC组(P<0.05);模型组与NC组大鼠肺组织中TNF-α、IL-6、MDA和SOD水平比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 miR-204可通过靶向TXNIP抑制脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织炎症反应和氧化应激,其机制可能与Trx表达升高有关.