HPV16 E5蛋白免疫优势肽段分析及其多克隆抗体的制备

• 作者: 唐婉林 王路得 顾美萍 Kamara SAIDU 汪琪 李明洋 陈韶 张丽芳
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 关键词: 人乳头瘤病毒 E5蛋白 免疫优势肽段 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 综述
• 页码范围: 725-729,739
• 页数: 6页
• 分类号: Q786|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 预测人乳头瘤病毒16型(human papillomavirus 16,HPV16) E5蛋白的免疫优势肽段,并制备其多克隆抗体.方法 以人HPV16 E5蛋白全长氨基酸序列为基础,采用Hopp&Woods的亲水性方案、Zimmerman极性参数、Jameson-Wolf抗原指数方案和Emini表面可及性方案及抗原性指数(antigenic index,AI)等生物信息学方法,综合分析E5蛋白免疫优势肽段.通过免疫日本大耳白兔进行E5蛋白免疫优势肽段的免疫原性验证并制备多克隆抗体;进一步采用ELISA法和间接免疫荧光试验分别检测多克隆抗体的效价及特异性.结果 HPV16 E5蛋白N-端1 ～17氨基酸序列(MTNLDTASTTLLACFLL)为免疫优势肽段,可诱导兔产生高水平的E5蛋白特异性IgG抗体,抗体滴度随免疫次数增加而升高;间接细胞免疫荧光试验结果显示,制备的多克隆抗体可特异性识别TC-1-E5细胞胞浆内表达的E5蛋白.结论 HPV16 E5蛋白氨基酸肽段(MTNLDTASTTLLACFLL)具有良好的免疫原性;成功制备了HPV16 E5蛋白多克隆抗体,为进一步研究HPV16 E5蛋白的生物学特性奠定了基础.