体外脂肪变L02细胞Notch家族和脂质代谢变化研究

• 作者: 吴伟杰 陈源文 丁雯瑾 范建高
• 来源期刊: 实用肝脏病杂志
• 关键词: L02肝细胞 Notch家族 γ-分泌酶抑制剂 棕榈酸 体外
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 实验性肝炎|Hepatitis in mice and in vitro
• 页码范围: 653-656
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5069.2021.05.012

摘要

目的 探讨脂肪变肝细胞Notch基因水平变化及其对脂质代谢的影响.方法 使用棕榈酸(PA)处理人L02细胞,构建体外脂肪变性细胞模型,采用不同浓度(0 mM、0.1 mM、0.25 mM和0.5mM)PA处理,并在0.25mM PA处理细胞,给予不同浓度(0μM、1μM、2μM、5μM和10μM)的γ分泌酶抑制剂(DAPT)干预L02细胞24 h,分别以0mM PA为对照组和0μM DAPT为模型组,采用实时定量PCR法检测Notch家族中Notch1、-2、-3及其下游Hes-1和Hey-1mRNA水平,采用比色法测定细胞谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)水平.结果 在0.25 mM和0.5 mM PA处理组,细胞Notch3 mRNA水平分别为(0.6±0.2)和(0.4±0.1),显著低于对照组[(1.0±0.1),P<0.01],Hes-1 mRNA水平分别为(1.7±0.2)和(1.5±0.1),显著高于对照组[(1.0±0.1),P<0.01];培养上清AST水平分别为(6.7±2.6)U/L和(12.4±1.6)U/L,显著高于对照组[(2.4±0.1)U/L,P<0.05],ALT水平分别为(5.7±0.8)U/L和(10.3±0.7)U/L,显著高于对照组[(2.2±0.3)U/L,P<0.01];细胞TG水平分别为(0.4±0.04)mmol/g和(0.4±0.04)mmol/g,显著高于对照组[(0.2±0.02)mmol/g,P<0.01];在0.5mM PA处理组,细胞Notch1 mRNA、TC和FFA水平分别为(1.9±0.1)、(1.2±0.4)mmol/g和(0.07±0.004)mmol/g,显著高于对照组[分别为(1.0±0.1)、(0.2±0.02)mmol/g和(0.02±0.001)mmol/g,P<0.01];采用不同浓度DAPT干预0.25mM PA处理细胞24 h,其中在2μM DAPT处理组,细胞Hes-1 mRNA、Hey-1 mRNA、培养上清AST和细胞TG水平分别为(0.5±0.1)、(0.6±0.3)、(6.4±2.9)U/L和(0.03±0.01)mmol/g,在5μM DAPT处理组分别为(0.4±0.2)、(0.6±0.1)、(7.3±1.3)U/L和(0.04±0.01)mmol/g,在10μM DAPT处理组分别为(0.3±0.2)、(0.4±0.1)、(4.9±0.7)U/L和(0.02±0.01)mmol/g,均显著低于模型组[分别为(1.0±0.1)、(1.0±0.04)、(12.2±0.3)U/L和(0.07±0.01)mmol/g,P<0.01];在10μM DAPT干预细胞,TC水平为(0.2±0.03)mmol/g,显著高于模型组[(0.1±0.02)mmol/g,P<0.01].结论 通过抑制Notch信号能有效降低体外培养的脂肪变细胞TG和培养上清AST水平,提示Notch信号通路可能参与了肝细胞脂质代谢过程,值得进一步的研究.