人胃癌细胞Caveolin-1基因的表达与DNA甲基化修饰之间的关系研究

• 作者: 毛立祺 戴春艳 金威洋 傅宇斐 陈喆 吕宾 王曦
• 来源期刊: 浙江中医药大学学报
• 关键词: 小窝蛋白-1 亚型 胃癌 甲基化 启动子区 CpG岛 转录调控 基因表达
• 年，卷（期）: 2021,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 939-944
• 页数: 6页
• 分类号: R331
• 语种: 中文
• DOI: 10.16466/j.issn1005-5509.2021.09.001

摘要

[目的]观察胃癌细胞系中小窝蛋白-1(Caveolin-1,Cav-1)基因不同亚型的表达水平,探讨影响其基因转录调控的甲基化修饰途径.[方法]选择Cav-1基因表达水平不同的胃癌细胞系,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)检测不同胃癌细胞系中Cav-1基因的两个亚型α和β的mRNA水平,之后利用磷酸胞苷酰(基)鸟苷(cytidylyl phosphate guanosine,CpG)岛在线预测软件对其启动子区和第一外显子区CpG岛分布情况进行分析,最后应用甲基化qPCR对其甲基化水平进行检测.[结果]Real-time qPCR结果显示,人胃癌细胞MGC-803中Cav-1以及Cav-1α的表达分别是人正常胃黏膜上皮细胞GES1的(1.782±0.489)倍和(2.604±0.945)倍,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);人胃癌细胞AGS中的Cav-1以及Cav-1α的表达则仅是GES1细胞的(0.017±0.002)倍和(0.0005±0.00003)倍,差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.001).相对于GES1细胞,MGC-803细胞和AGS细胞中Cav-1β的mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05).利用CpG岛在线预测软件分析结果表明,人Cav-1α基因的启动子区存在一个174bp大小的CpG岛,该岛位于相对于转录起始位点(transcription start stecte,TSS)+1的-250～-77区域内,包含了17个CG位点.甲基化qPCR检测发现,Cav-1α基因启动子区-158～-77区域处于去甲基化状态,则Cav-1α的mRNA表达水平较高,相反,该区域处于高度甲基化状态,则其mRNA表达较低.[结论]人胃癌细胞中Cav-1的表达主要与其α亚型的表达相关,与β亚型无关;并且其启动子区CpG岛内-158～-77区域的甲基化修饰程度与其mRNA转录调控水平密切相关.