摘要:
目的 探讨YY1在子宫内膜癌(EC)中表达及其对癌细胞侵袭和迁移能力的影响.方法 以2017年7月至2020年7月期间在本院收集的105例EC患者的癌组织及距离癌组织3 cm处的105例癌旁组织为研究对象,免疫组织化学检测组织中YY1蛋白的表达;以人子宫内膜上皮细胞ESC及人EC细胞HEC-1A、Ishikawa、EN-1078D、AN3CA为研究对象,Western blot检测细胞中YY1蛋白的表达;取对数生长期的AN3CA细胞,利用LipofectamineTM2000转染试剂盒对其进行转染,并分为AN3CA组、AN3CA-NC组、AN3CA-YY1组,另取对数生长期的Ishikawa细胞,通过细胞转染技术对其进行转染,并分为 Ishikawa 组、Ishikawa-sh-NC 组、Ishikawa-sh-YY1-1 组、Ishikawa-sh-YY1-2组、Ishikawa-sh-YY1-3组,划痕实验检测各组细胞迁移能力;Transwell实验检测各组细胞侵袭能力;Western blot检测各组细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达.结果 YY1主要定位于细胞核中,与癌旁组织比较,EC组织中YY1阳性区域更多,染色更深;与ESC细胞比较,HEC-1A、Ishikawa、EN-1078D、AN3CA细胞中YY1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),且YY1蛋白在Ishikawa细胞中表达水平最高,在AN3CA细胞中表达水平最低,因此,分别选用AN3CA细胞、Ishikawa细胞进行YY1过表达、YY1敲降表达的慢病毒载体稳定转染细胞株的构建;与AN3CA组、AN3CA-NC组比较,AN3CA-YY1组细胞划痕愈合率、侵袭细胞数目、YY1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与 Ishikawa 组、Ishikawa-sh-NC 组比较,Ishikawa-sh-YY1-1 组、Ishikawa-sh-YY1-2组、Ishikawa-sh-YY1-3组细胞中YY1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),且Ishikawa-sh-YY1-1组细胞中YY1沉默效果最显著,因此,选用 Ishikawa-shi-YY1-1 组进行后续研究.与 Ishikawa 组、Ishikawa-sh-NC 组比较,Ishikawa-sh-YY1-1组细胞划痕愈合率、侵袭细胞数目、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.05).结论 YY1在EC组织和细胞中高表达,过表达YY1可促进EC细胞迁移与侵袭,沉默YY1可抑制EC细胞迁移与侵袭.