根癌农杆菌vbp2基因启动子转录调控的探析

• 作者: 徐楠 徐宇娟 孙盼 宗仁杰 郭敏亮
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 根癌农杆菌 vbp2基因 转录调控 转录活性 荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2021,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 41-49
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2021-0151

摘要

根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)能够将自身质粒上的部分DNA片段(简称T-DNA)以T-复合物的形式转运、整合至宿主基因组,而用作高效的植物转基因工具.vbp2是编码VBP蛋白的3个同源基因之一,VBP蛋白通过与T-复合物上的VirD2结合参与T-DNA的转运过程.根据生物信息学预测,vbp2基因的启动子区可能含有多个转录调控元件.通过同源重组的方法,将A.tumefaciens染色体上的vbp2基因替换成编码红色荧光蛋白的rfp基因,使vbp2的启动子控制rfp的表达,因此,可通过测定所表达的RFP的荧光强度来表征vbp2启动子的活性.结果表明:乙酰丁香酮(AS)和鼠李糖(Rha)均能诱导vbp2启动子表达RFP,AS和Rha的最佳诱导浓度分别为150μmol/L和100μmol/L.通过截短vbp2启动子DNA片段的方法,证明响应AS和Rha诱导的调控区域分别位于上游的165-260 bp和126-165 bp.