长链非编码RNA NEAT1调控微小RNA-506/组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶对肾癌786-O细胞生物学行为的影响

• 作者: 柯炜 周洪勇 胡子好 叶清 姚小兵 宁金卓
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 肾癌 长链非编码RNA 微小RNA
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 泌尿外科
• 页码范围: 1049-1052
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn421213-20200728-01270

摘要

目的:探讨长链非编码RNA NEAT1(lncRNA NEAT1)在肾癌中的表达，以及在肾癌786-O细胞中对增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用，以及对微小RNA-506(microRNA-506，miR-506)/组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)信号通路的影响。方法:选取2018年1月至2019年12月武汉大学人民医院收集的38例肾癌组织及癌旁组织样本作为研究对象，采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测肾癌组织及相应癌旁正常组织临床样本中lncRNA NEAT1的表达水平；使用在线数据库及采用荧光素酶实验验证NEAT1和miR-506以及EZH2和miR-506的靶向关系；采用噻唑蓝(MTT)法，双染法流式细胞术和细胞迁移侵袭(Transwell)实验观察细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭水平的改变；采用RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)法分别测miR-506和EZH2蛋白的表达。组间比较采用 t检验。 结果:lncRNA NEAT1在肾癌组织中表达水平(4.45±0.31)高于癌旁组织(2.39±0.25)，差异有统计学意义( t＝8.959， P<0.05)。荧光素酶报告实验结果表明NEAT1序列上有miR-506的结合位点，且EZH2是miR-506的下游靶基因。si-NEAT1组24、48和72 h增殖率[(24.67±3.23)%、(40.82±5.03)%、(56.87±6.12)%]明显低于si-NC组[(62.63±4.35)%、(74.18±6.55)%、(87.45±7.21)%]，差异有统计学意义( t＝-12.135、-6.997、-5.601， P<0.01)。si-NEAT1组凋亡水平[(23.20±1.92)%]显著高于si-NC组[(9.65±1.34)%]，差异有统计学意义( t＝10.024， P<0.05)。si-NEAT1组迁移和侵袭数量[(52.35±4.76)、(21.63±2.05)个]显著低于si-NC组[(91.23±7.59)、(42.68±3.98)个]，差异有统计学意义( t＝-7.517， P<0.05； t＝-8.144， P<0.05)。RT-qPCR结果显示，si-NC及si-NEAT1两组的miR-506 mRNA表达量分别为1.00±0.00、3.39±0.26，差异有统计学意义( t＝15.922， P<0.05)。si-NEAT1组EZH2蛋白表达水平(0.15±0.02)明显低于si-NC组EZH2蛋白表达水平(0.32±0.03)，差异有统计学意义( t＝-8.167， P<0.05)。 结论:LncRNA NEAT1在肾癌中高表达，其可能通过调控miR-506/EZH2信号途径改变肾癌786-O细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的能力。