特异性敲低海马RNA甲基转移酶Pcif1对空间学习记忆的影响与机制研究

• 作者: 孙祖浩 所信君 夏贤友 赵爽 窦妍 于春水
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: tRNA甲基转移酶类 海马 空间学习 空间记忆 细胞凋亡 细胞增殖 Pcif1
• 年，卷（期）: 2022,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 802-809
• 页数: 7页
• 分类号: R338.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20220477

摘要

目的 探索RNA甲基转移酶Pcif1对海马相关空间学习记忆的影响及分子机制。方法 选择27只8周龄的雄性C57BL/6J Nifdc小鼠进行动物实验，随机分为3组（每组9只）：Pcif1敲低组（对小鼠海马立体定位注射1 μL的腺相关病毒包装的靶向Pcif1的shRNA）、假手术组（对小鼠海马立体定位注射1 μL的对照腺相关病毒）、野生组（不做处理）。3周后，Morris水迷宫实验用于测试小鼠的空间学习记忆能力，Western blot检测小鼠海马组织中相关蛋白的表达。选择小鼠海马神经元来源的HT22细胞系进行体外实验，细胞分为2组：HT22-shPcif1组（通过慢病毒包装的靶向Pcif1的shRNA实现细胞Pcif1的敲低）和HT22-Ctrl组（通过对照慢病毒感染细胞），通过全转录组测序（RNA-seq）、细胞毒性实验（CCK-8）、细胞划痕和流式细胞术研究敲低Pcif1影响学习记忆的机制。结果 与野生组和假手术组相比，敲低组小鼠的空间学习记忆能力增强，小鼠海马中的抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调。与HT22-Ctrl组相比，HT22-shPcif1组差异表达的基因富集到凋亡、迁移和增殖通路，细胞迁移能力增强，在400 μmol/L H2O2条件下细胞增殖能力提高，凋亡水平下降。结论 选择性敲低海马Pcif1可以促进小鼠的空间学习记忆，其机制可能与抗凋亡蛋白上调，促进细胞迁移和增殖有关。