miR-411-5p靶向SPHK1基因调控宫颈癌细胞存活和凋亡的分子机制

• 作者: 王洪伟 林娟
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 关键词: miR-411-5p SPHK1 宫颈癌 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2145-2149
• 页数: 5页
• 分类号: R711.74
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2021.10.038

摘要

目的 探讨miR-411-5p对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 将miR-con、miR-411-5p、anti-miR-con、anti-miR-411-5p、si-con、si-SPHK1分别转染至SiHa细胞中,分别记为miR-con组、miR-411-5p组、anti-miR-con组、anti-miR-411-5p组、si-con组、si-SPHK1组;将miR-411-5p质粒分别与pcDNA、pcDNA-SPHK1共转染至SiHa细胞中,分别记为miR-411-5p+pcDNA组、miR-411-5p+pcDNA-SPHK1组;转染均采用脂质体法.实时荧光定量-聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-411-5p表达水平;Western印迹检测鞘氨醇激酶(SPHK)1、细胞核增殖抗原标记物(Ki67)、细胞周期素(Cyclin)D1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-9表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测miR-411-5p和SPHK1的靶向关系.结果 与正常宫颈细胞Ect1/E6E7相比,宫颈癌细胞HeLa、SiHa、C33a、Caski中SPHK1高表达,miR-411-5p低表达.过表达miR-411-5p和沉默SPHK1宫颈癌细胞SiHa中Ki67、CyclinD1表达水平显著降低,酶切caspase-3、酶切caspase-9表达水平显著升高,细胞活性显著降低,细胞凋亡率显著升高(均P<0.05).miR-411-5p靶向调控SPHK1表达;过表达SPHK1部分逆转miR-411-5p对宫颈癌细胞增殖抑制和凋亡促进作用.结论 过表达miR-411-5p可抑制宫颈癌细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与miR-411-5p表达有关.