肝特异性LCMT1基因敲除小鼠模型的制备及鉴定

• 作者: 莫娇 敖青青 郑志坚 吴懿洁 梁宁静 廖思米 王新航 陆彩玲 唐深 李习艺
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 肝 LCMT1 Cre/Loxp 基因敲除
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 17-22
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2022.01.002

摘要

目的 建立肝特异性LCMT1基因敲除小鼠模型.方法 运用CRISPR/Cas9技术构建肝特异性LCMT1-KO小鼠.通过RT-PCR、实时定量PCR、Western Blot和HE染色等方法鉴定及比较野生和敲除小鼠的差异;观察和分析两组小鼠的一般情况、繁殖能力和子代存活率.结果 成功鉴定子代的基因型;LCMT1-KO小鼠肝LCMT1 mRNA和蛋白质水平显著低于对照组小鼠;两组小鼠的饮食、饮水、体重、繁殖能力、子代存活率、肝外观和HE染色无明显差异;LCMT1-KO小鼠心脏、大脑和肾组织中LCMT1表达与对照组相比没有显著变化;LCMT1-KO小鼠sgRNA未发生脱靶.结论 成功构建肝特异性LCMT1基因敲除小鼠,为研究LCMT1基因在疾病中的调控作用提供实验手段.