茶树花粉中丙酮酸脱氢酶（CsE1α）的定位分析及其启动子的克隆与表达

• 作者: 杜昱林 王伟东 王玉花 黎星辉
• 学科: 农学
• 关键词: 茶树 丙酮酸脱氢酶 启动子 亚细胞定位 抗寒
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 页码范围: 290-298
• 页数: 8页
• 分类号: S571.1,Q946.5
• 语种: 中文

摘要

根据以往试验获得的CsE1α的cDNA全长序列，利用TAIL-PCR克隆CsE1α启动子。测序验证与生物信息学分析后发现，该启动子片段长336bp，含有2个CAAT-box，2个TATA-box，2个GATA-box，1个LTR，1个G-box等顺式作用元件。构建载体转入洋葱内表皮细胞瞬时表达，启动子可启动下游报告基因，使荧光蛋白表达于整个细胞，表明所克隆的启动子具有启动功能。CsE1α与GFP融合蛋白瞬时表达表明CsE1α定位于线粒体。本实验为下一步转基因拟南芥稳定表达，进一步研究CsE1α基因的表达调控，探讨茶树花粉抗寒的分子生物学机理奠定基础。