血根碱通过上调m6A甲基转移酶14对胃癌细胞增殖和侵袭的抑制作用

• 作者: 陈鸣 张靖
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 血根碱 甲基转移酶14 N6-甲基腺嘌呤 细胞增殖 细胞侵袭
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究|Basic research
• 页码范围: 135-141
• 页数: 7页
• 分类号: R735.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.02.001

摘要

目的 ·探讨血根碱(sanguinarine,SAG)对胃癌细胞MGC-803和AGS增殖和侵袭的影响,及其作用机制与N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基转移酶(methyltransferase 14,METTL14)的关系.方法 ·利用不同浓度SAG(0、10、20μmol/L)处理胃癌细胞系MGC-803和AGS,48 h后通过定量PCR和Western blotting检测SAG对METTL14表达的影响.然后用METTL14的小干扰RNA(si-METTL14)慢病毒载体或其空载对照si-NC慢病毒载体转染上述2个胃癌细胞系,再以10μmol/L SAG或PBS处理48 h,将细胞分为si-METTL14+SAG组、si-NC+SAG组和si-NC+PBS组.定量PCR和Western blotting验证si-METTL14转染后METTL14在胃癌细胞的表达水平.噻唑蓝(MTT)细胞增殖实验、细胞克隆形成实验及Transwell侵袭实验分别观察3组细胞的增殖水平、克隆形成数量及侵袭潜能.2组数据间比较采用独立样本t检验,2组以上数据间比较采用单因素方差分析.结果 ·与对照组(0μmol/L)比较,10μmol/L、20μmol/L SAG在2种胃癌细胞中均可上调METTL14的mRNA和蛋白表达水平(均P<0.05),且呈一定的浓度依赖性.定量PCR和Western blotting结果证实,转染si-METTL14后METTL14在胃癌细胞的表达水平显著降低.MTT细胞增殖实验结果显示,si-NC+SAG组较si-NC+PBS组细胞增殖率显著降低(均P=0.000);克隆形成实验结果显示,si-NC+SAG组较si-NC+PBS组细胞克隆数显著减少(均P<0.01);Transwell侵袭实验结果显示,si-NC+SAG组较si-NC+PBS组穿过基底胶(Matrigel)的细胞数量显著减少(均P<0.01).而si-METTL14可以部分逆转SAG的上述对胃癌细胞的抑制作用.结论 ·SAG可以抑制胃癌细胞的增殖活性、克隆形成及侵袭潜能,这些作用可能是通过上调METTL14表达水平实现的.