利用多重荧光定量PCR方法检测线粒体DNA拷贝数

• 作者: 孙国祝 路萌 王决恒 周宇荀 李凯 肖君华
• 来源期刊: 东华大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 线粒体DNA拷贝数 荧光定量PCR 高拷贝内参基因
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文|Research Papers
• 页码范围: 93-96
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 语种: 中文
• DOI: 10.19886/j.cnki.dhdz.2020.0480

摘要

为准确快速地检测出线粒体DNA拷贝数,建立新型多重荧光定量PCR(polymerase chain reaction)方案.该方案以高拷贝基因(300拷贝)替代以往单拷贝基因作为内参,减小线粒体拷贝数与内参基因拷贝数差异,同时,该方案在单管中检测线粒体和内参基因的拷贝数,消除了在不同管中检测内参基因和目的基因时的孔间差.此外考察了不同DNA抽提方法对线粒体DNA拷贝数检测结果的影响,并且构建质粒标准品(含有内参基因和线粒体DNA区段).采用该方案检测100例中国人外周血样本线粒体DNA拷贝数,发现线粒体DNA拷贝数与年龄呈现负相关.该新型多重荧光定量PCR方案适用于大规模人群中线粒体DNA拷贝数的检测.