抗BVDV Erns蛋白单克隆抗体制备及生物学特性鉴定

• 作者: 陈文龙 米晓钰 张阳阳 张生英 张玉珺 邢小勇 胡永浩
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: BVDV Erns蛋白 单克隆抗体 抗体生物学特性
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文|Research articles
• 页码范围: 115-125
• 页数: 11页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

为制备抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)Erns蛋白单克隆抗体,本试验用Erns重组蛋白免疫Balb/c鼠,刺激小鼠脾脏产生特异性免疫细胞;通过化学剂诱导剂PEG-4000诱导免疫细胞和骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤细胞;间接ELISA方法结合亚克隆方法筛选阳性细胞孔;鉴定为稳定分泌抗体的细胞株做扩大培养,细胞悬液计数并无菌注射KM小鼠腹腔,制备、收集腹水抗体;SDS-PAGE鉴定抗体大小、ELISA测定抗体效价、Western blot和IFA鉴定抗体特异性.本试验建立了3株稳定分泌抗体的细胞株;腹水抗体重链大小为55 kDa,轻链25 kDa,均为IgG1型,效价高于104,抗体可特异性结合病毒抗原.结果证实,制备的单克隆抗体效价高、特异性好,为制备检测BVDV试剂盒奠定基础.