野蔷薇内源多胺的HPLC测定方法及其组织变化规律

• 作者: 陈锐 陈金萍 杨雯翔 邓致运 程文翰
• 来源期刊: 安徽大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 野蔷薇 高效液相色谱法HPLC 多胺 体细胞胚胎发生
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 化学与生命科学
• 页码范围: 101-108
• 页数: 8页
• 分类号: S601
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2162.2022.02.013

摘要

以野蔷薇为材料,提取内源多胺,用高效液相色谱法HPLC进行腐胺、亚精胺、精胺含量测定.结果表明,多胺提取过程中,样品用量0.2 g、冰浴浸提液300μL、苯甲酰化反应37℃,提取效率最高.HPLC检测参数:流动相为V(甲醇):V(水)(60:40),进样量15μL,流速1 mL·min-1,柱温30℃,检测波长254 nm,保留时间15 min时,3种内源多胺可完全分离并定量测定,相关系数均大于0.99,测定加标回收率为87.17％～103.64％,表明该方法可靠.在野蔷薇体细胞胚胎发生过程中,叶片培养3 h,内源多胺无明显变化,培养3 d后,多胺总量和腐胺含量显著增加,5d后,亚精胺和精胺含量显著增加,亚精胺含量最高,精胺其次,腐胺含量极显著下降,同时多胺总量下降,说明在野蔷薇体细胞胚胎发生的启动阶段,腐胺向下游产物亚精胺和精胺发生了转化;在培养25 d的愈伤组织中,多胺总量显著下降,腐胺和精胺含量很低,说明在野蔷薇愈伤组织增殖阶段,可能精胺作用不大.该试验建立了内源多胺的2 mL提取体系,该方法降低了样品材料的用量,多胺提取过程更简便高效,并初步探索了野蔷薇体细胞胚胎发生过程中内源多胺的变化规律.