Leifsonia sp.ZF2019中一种新型耐木糖β-木糖苷酶的表达与特征

• 作者: 何易 焦镕虎 王晨曦 王茜 许光治
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: Leifsonia sp.ZF2019 GH3糖苷水解酶 β-木糖苷酶 盐耐受性 木糖耐受性
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告|RESEARCH ARTICLES
• 页码范围: 1452-1463
• 页数: 12页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20210446

摘要

[目的]从栀子灰蝶幼虫分离的Leifsonia sp.ZF2019菌株中克隆表达出一种新型β-木糖苷酶Xy14900,并研究其酶学性质,以期为开发适用于工业生产的β-木糖苷酶提供参考.[方法]采用生物信息学分析技术分析Leifsonia sp.ZF2019菌株的β-木糖苷酶Xy14900基因并在大肠杆菌中表达了该基因,纯化并研究了其酶学性质.[结果]Xy14900与GH3家族的β-葡萄糖苷酶同源性高,但带有β-木糖苷酶结构域,可特异性水解对硝基苯基β-D-吡喃木糖普(pNPX),是一种新型β-木糖苷酶.酶学特性分析显示,Xy14900在45℃和pH 7.0的条件下酶活性最高,且在pH 6.0-9.0的范围内孵育14h,仍保持80％以上的酶活力.除Cu2+外,其他金属离子(2.5 mmol/L)对Xy14900酶活力无明显影响,且对低浓度有机溶剂(5％V/V)有较强耐受性.此外,在20％(W/V)NaCl或100 mmol/L木糖溶液中Xy14900的酶活性仍高于50％,表现出较好的盐和木糖耐受性.动力学参数分析显示,Xy14900的Km值、Vmax值和木糖抑制常数Ki值分别为0.80 mmol/L、36.10 U/mg和150.12 mmol/L.特别地,Xy14900能够很好地降解木二糖、木三糖.[结论]Xy14900具有良好的pH稳定性、木糖及盐耐受性,能够较好地应用到半纤维素降解和其他工业生产中.