钛学术
文献服务平台
学术出版新技术应用与公共服务实验室出品
首页
论文降重
免费查重
学术期刊
任务中心
登录
文献导航
学科分类
>
综合
工业技术
科教文艺
医药卫生
基础科学
经济财经
社会科学
农业科学
哲学政法
社会科学II
哲学与人文科学
社会科学I
经济与管理科学
工程科技I
工程科技II
医药卫生科技
信息科技
农业科技
数据库索引
>
中国科学引文数据库
工程索引(美)
日本科学技术振兴机构数据库(日)
文摘杂志(俄)
科学文摘(英)
化学文摘(美)
中国科技论文统计与引文分析数据库
中文社会科学引文索引
科学引文索引(美)
中文核心期刊
默认
篇关摘
篇名
关键词
摘要
全文
作者
作者单位
基金
分类号
搜索文章
搜索思路
钛学术文献服务平台
\
学术期刊
\
医药卫生期刊
\
外科学期刊
\
中华烧伤杂志期刊
\
人脂肪间充质干细胞外泌体对小鼠RAW264.7细胞的炎症反应和小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响
人脂肪间充质干细胞外泌体对小鼠RAW264.7细胞的炎症反应和小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响
作者:
沈括
王许杰
刘开拓
李少珲
李晋
张锦鑫
王洪涛
胡大海
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
伤口愈合
炎症
外泌体
脂肪间充质干细胞
摘要:
目的:探讨人脂肪间充质干细胞(ADSC)外泌体对小鼠RAW264.7细胞介导的炎症反应和小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响。方法:采用实验研究方法。取2020年6—9月于空军军医大学第一附属医院行腹部手术的3例女性患者(10~25岁)废弃脂肪组织,采用Ⅰ型胶原酶消化法提取ADSC,采用流式细胞术进行鉴定。使用差速超高速离心法提取人ADSC外泌体,采用透射电子显微镜观察形态,纳米颗粒跟踪分析仪检测粒径,蛋白质印迹法检测CD9、CD63、肿瘤易感基因101(TSG101)和β肌动蛋白的蛋白表达。将人ADSC外泌体与RAW264.7细胞共培养12 h后,观察RAW264.7细胞对人ADSC外泌体的吞噬情况。将RAW264.7细胞分为采用磷酸盐缓冲液(PBS)刺激适宜时间的PBS组及内毒素/脂多糖(LPS)刺激相应时间点的LPS刺激2 h组、LPS刺激4 h组、LPS刺激6 h组、LPS刺激12 h组、LPS刺激24 h组,每组3孔,采用实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)法检测白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6及IL-10的mRNA表达。将RAW264.7细胞分为PBS组、单纯LPS组、LPS+ADSC外泌体组,每组3孔,按前一实验筛选的时间进行相应刺激,采用实时荧光定量RT-PCR法检测IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10、转化生长因子β(TGF-β)及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达,采用蛋白质印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)的蛋白表达。取24只8周龄雄性BALB/c小鼠,采用随机数字表法分为ADSC外泌体组和PBS组,每组12只,在背部造成1 cm×1 cm的全层皮肤缺损创面。伤后即刻,2组小鼠创面分别进行相应的处理。伤后1 d,采用酶联免疫吸附测定法检测血清中IL-1β和TNF-α的浓度,采用实时荧光定量RT-PCR法检测创面组织IL-1β、TNF-α及IL-6的mRNA表达。伤后3、6、9、12、15 d观察创面愈合情况,并计算创面未愈合率;伤后15 d,行苏木精-伊红染色和Masson染色,分别检测创面皮肤附件缺损长度及胶原容积分数(CVF);免疫组织化学法检测创面CD31表达及血管新生情况;免疫荧光法检测创面Ki67阳性细胞比、iNOS和Arg1双阳性细胞比、iNOS阳性细胞和Arg1阳性细胞的比值及两者的荧光强度。动物实验中样本数均为6。对数据行重复测量方差分析、单因素方差分析、独立样本 t检验。 结果:培养12 h,细胞呈典型梭形结构,经流式细胞术鉴定为ADSC。外泌体呈囊泡状,粒径29~178 nm,表达CD9、CD63及TSG101而不表达β肌动蛋白。共培养12 h后,人ADSC外泌体成功被RAW264.7细胞吞入细胞质。LPS刺激2 h组、LPS刺激4 h组、LPS刺激6 h组、LPS刺激12 h组、LPS刺激24 h组RAW264.7细胞IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10 mRNA表达均明显高于PBS组( t值分别为39.10、14.55、28.80、4.74,48.80、22.97、13.25、36.34,23.12、18.71、29.19、41.08,11.68、18.06、8.54、43.45,62.31、22.52、21.51、37.13, P<0.01),选择各种炎症因子表达均高表达的刺激12 h作为后续实验时间点。刺激12 h后,单纯LPS组RAW264.7细胞IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10 mRNA表达均明显高于PBS组( t值分别为44.20、51.26、14.71、8.54, P<0.01);LPS+ADSC外泌体组RAW264.7细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达均明显低于单纯LPS组( t值分别为22.89、25.51、8.03, P<0.01),而IL-10、TGF-β和VEGF mRNA表达均明显高于单纯LPS组( t值分别9.89、13.12、7.14, P<0.01)。刺激12 h后,单纯LPS组RAW264.7细胞iNOS的蛋白表达明显高于PBS组和LPS+ADSC外泌体组( t值分别为11.20、5.06, P<0.05或 P<0.01),Arg1蛋白表达明显低于LPS+ADSC外泌体组( t=15.01, P<0.01)。伤后1 d,ADSC外泌体组小鼠血清中IL-1β和TNF-α浓度及创面组织中IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达均明显低于PBS组( t值分别为15.44、12.24,9.24、7.12、10.62, P<0.01)。伤后3、6、9、12、15 d,ADSC外泌体组小鼠创面未愈合率分别为(73.2±4.1)%、(53.8±3.8)%、(42.1±5.1)%、(24.1±2.8)%、0,均分别明显低于PBS组的(82.5±3.8)%、(71.2±4.6)%、(52.9±4.1)%、(41.5±3.6)%、(14.8±2.5)%( t值分别为4.77、8.93、5.54、7.63、7.59, P<0.01)。伤后15 d,PBS组小鼠创面皮肤附件缺损长度明显长于ADSC外泌体组( t=9.50, P<0.01),CVF明显低于ADSC外泌体组( t=9.15, P<0.01)。伤后15 d,ADSC外泌体组小鼠创面组织CD31阳性表达和新生血管数( t=12.99, P<0.01)明显多于PBS组,Ki67阳性细胞比明显高于PBS组( t=7.52, P<0.01)。伤后15 d,PBS组小鼠创面组织iNOS和Arg1双阳性细胞比为(12.33±1.97)%,明显高于ADSC外泌体组的(1.78±0.29)%( t=13.04, P<0.01),且iNOS荧光强度明显强于ADSC外泌体组,Arg1荧光强度明显强于ADSC外泌体组,iNOS阳性细胞和Arg1阳性细胞的比值明显高于ADSC外泌体组( t=35.16, P<0.01)。 结论:人ADSC外泌体可以减轻小鼠RAW264.7细胞的炎症反应,在小鼠全层皮肤缺损创面中减少巨噬细胞浸润和促炎性细胞因子分泌,增加抗炎细胞因子分泌,促进新生血管形成,增强创面细胞增殖,加速创面愈合。
暂无资源
收藏
引用
分享
推荐文章
脱细胞真皮联合骨髓间充质干细胞修复糖尿病大鼠皮肤全层缺损创面的研究
脱细胞真皮
骨髓间充质干细胞
糖尿病创面
间充质干细胞源性外泌体及其在创面修复中的研究进展
间充质干细胞
外泌体
皮肤
创面修复
研究进展
携带小鼠KLF4基因重组慢病毒的构建及对RAW264.7细胞增殖的影响
Krüppel样转录因子类
慢病毒感染
遗传载体
细胞周期
细胞增殖
Krüppel样因子4
人羊膜负载人羊膜间充质干细胞对SD大鼠皮肤创面愈合的影响
人羊膜
人羊膜间充质干细胞
创伤修复
角蛋白19
血管内皮生长因子
内容分析
文献信息
引文网络
相关学者/机构
相关基金
期刊文献
内容分析
关键词云
关键词热度
相关文献总数
(/次)
(/年)
文献信息
篇名
人脂肪间充质干细胞外泌体对小鼠RAW264.7细胞的炎症反应和小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响
来源期刊
中华烧伤与创面修复杂志
学科
关键词
伤口愈合
炎症
外泌体
脂肪间充质干细胞
年,卷(期)
2022,(3)
所属期刊栏目
论著·感染及脓毒症
研究方向
页码范围
215-226
页数
12页
分类号
字数
语种
中文
DOI
10.3760/cma.j.cn501120-20201116-00477
五维指标
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献
(0)
共引文献
(0)
参考文献
(0)
节点文献
引证文献
(0)
同被引文献
(0)
二级引证文献
(0)
2022(0)
参考文献(0)
二级参考文献(0)
引证文献(0)
二级引证文献(0)
研究主题发展历程
节点文献
伤口愈合
炎症
外泌体
脂肪间充质干细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华烧伤杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1009-2587
CN:
50-1120/R
开本:
大16开
出版地:
重庆市沙坪坝区高滩岩正街
邮发代号:
78-131
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
4698
总下载数(次)
6
期刊文献
相关文献
1.
脱细胞真皮联合骨髓间充质干细胞修复糖尿病大鼠皮肤全层缺损创面的研究
2.
间充质干细胞源性外泌体及其在创面修复中的研究进展
3.
携带小鼠KLF4基因重组慢病毒的构建及对RAW264.7细胞增殖的影响
4.
人羊膜负载人羊膜间充质干细胞对SD大鼠皮肤创面愈合的影响
5.
人骨髓间充质干细胞来源外泌体分离、鉴定及卵巢摄取
6.
氯喹对脂多糖诱导RAW264.7细胞损伤的影响
7.
脂多糖刺激的骨髓间充质干细胞来源外泌体 改善小鼠心肌梗死后炎症和纤维化
8.
活性氧参与脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7活化诱导凋亡
9.
外泌体对过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化能力促进作用的研究
10.
移植途径对骨髓间充质干细胞调节小鼠心脏移植排斥反应的影响
11.
人脐带间充质干细胞对脐血CD34~+细胞在NOD/SCID小鼠体内造血重建的影响
12.
脐带间充质干细胞外泌体对慢性阻塞性肺疾病大鼠 肺部炎症的作用机制探讨
13.
间充质干细胞来源的外泌体抑制乳腺癌细胞生长的研究
14.
基于RNA-Seq技术探讨洋参芎芍方改善RAW264.7巨噬细胞代谢及炎症反应的机制
15.
RAW264.7细胞在体外分化成破骨细胞的研究
推荐文献
钛学术
文献服务平台
学术出版新技术应用与公共服务实验室出品
首页
论文降重
免费查重
学术期刊
任务中心
登录
根据相关规定,获取原文需跳转至原文服务方进行注册认证身份信息
完成下面三个步骤操作后即可获取文献,阅读后请
点击下方页面【继续获取】按钮
钛学术
文献服务平台
学术出版新技术应用与公共服务实验室出品
原文合作方
继续获取
获取文献流程
1.访问原文合作方请等待几秒系统会自动跳转至登录页,首次访问请先注册账号,填写基本信息后,点击【注册】
2.注册后进行实名认证,实名认证成功后点击【返回】
3.检查邮箱地址是否正确,若错误或未填写请填写正确邮箱地址,点击【确认支付】完成获取,文献将在1小时内发送至您的邮箱
*若已注册过原文合作方账号的用户,可跳过上述操作,直接登录后获取原文即可
点击
【获取原文】
按钮,跳转至合作网站。
首次获取需要在合作网站
进行注册。
注册并实名认证,认证后点击
【返回】按钮。
确认邮箱信息,点击
【确认支付】
, 订单将在一小时内发送至您的邮箱。
*
若已经注册过合作网站账号,请忽略第二、三步,直接登录即可。
期刊分类
期刊(年)
期刊(期)
期刊推荐
中国医学
临床医学
五官科学
内科学
医疗保健
医药卫生总论
基础医学
外科学
大学学报
妇产科学与儿科学
特种医学
皮肤病学与性病学
神经病学与精神病学
肿瘤学
药学
预防医学与卫生学
中华烧伤杂志2022
中华烧伤杂志2021
中华烧伤杂志2020
中华烧伤杂志2019
中华烧伤杂志2018
中华烧伤杂志2017
中华烧伤杂志2016
中华烧伤杂志2015
中华烧伤杂志2014
中华烧伤杂志2013
中华烧伤杂志2012
中华烧伤杂志2011
中华烧伤杂志2010
中华烧伤杂志2009
中华烧伤杂志2008
中华烧伤杂志2007
中华烧伤杂志2006
中华烧伤杂志2005
中华烧伤杂志2004
中华烧伤杂志2003
中华烧伤杂志2002
中华烧伤杂志2001
中华烧伤杂志2000
中华烧伤杂志2022年第5期
中华烧伤杂志2022年第4期
中华烧伤杂志2022年第3期
中华烧伤杂志2022年第2期
中华烧伤杂志2022年第1期
关于我们
用户协议
隐私政策
知识产权保护
期刊导航
免费查重
论文知识
钛学术官网
按字母查找期刊:
A
B
C
D
E
F
G
H
I
J
K
L
M
N
O
P
Q
R
S
T
U
V
W
X
Y
Z
其他
联系合作 广告推广: shenyukuan@paperpass.com
京ICP备2021016839号
营业执照
版物经营许可证:新出发 京零 字第 朝220126号