德尔卑沙门氏菌分子等温活菌检测体系的建立

• 作者: 翟立公 黄菊 李港回 王俊颖
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 德尔卑沙门氏菌 重组酶聚合酶扩增 叠氮溴化丙锭 特异性基因
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 生物实验室|BIOLOGICAL LAB
• 页码范围: 1214-1223
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.210769

摘要

[背景]德尔卑沙门氏菌(Salmonella enterica subsp.enterica Derby)是危害人类生命安全的主要致病性血清型.[目的]建立一种准确、快速检测德尔卑沙门氏菌的方法.[方法]通过建立叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)-重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)的方法准确有效地检测样品中的活德尔卑沙门氏菌.[结果]使用基因RU61_00441作为检测靶点,设计引物SD1正确地鉴定了所有被测菌株.实验结果表明,PMA处理能有效区分活细胞和死细胞.基因组DNA检测限为761.2 fg/μL,活菌检测限为45 CFU/mL.此方法检测德尔卑沙门氏菌的血清型不受自然背景(猪肉、鸡肉和牛肉)菌群基因组DNA的影响.此外,该方法还可以检测出动物性食品中富集6 h后浓度低至3.9 CFU/mL的德尔卑沙门氏菌.[结论]这种PMA-RPA检测方法耗时短并具有更好的灵敏度和特异性,能为沙门氏菌的检测提供更有效的指导.