黑曲霉金属蛋白酶的克隆表达与性质鉴定

• 作者: 冯玮 宋鹏
• 来源期刊: 食品研究与开发
• 关键词: 金属蛋白酶 黑曲霉 克隆表达 酶学性质 水解蛋白
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 所属期刊栏目: 生物工程|Bioengineering
• 页码范围: 194-202
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.12161/j.issn.1005-6521.2022.04.028

摘要

在毕赤酵母中克隆表达黑曲霉CGMCC 3.7193中一个疑似金属蛋白酶基因MPase,分离纯化后对重组酶MPase进行理化特征分析.结果显示,纯化后的MPase:比酶活达到1859.2 U/mg,最适反应温度35℃,最适反应pH7.0;在低于40℃,pH5.0～8.0之间稳定;偏好水解大豆分离蛋白,Km和Vmax分别为3.9 mg/mL、892.7 mg/(mL·min);金属离子Co2+和Zn2+对其有激活作用,Cu2+和Fe2+对其有抑制作用;酶解大豆分离蛋白水解度可达到14.7％,并且产物分子量大小均匀;可耐受5000 mmol/L NaCl,在50℃保持30 min即可完全失活.其酶学特征表明:MPase在食品工业尤其在发酵食品加工中具有较大应用潜力.