基于溶酶体钙离子通道TRPML1探讨罗哌卡因在诱导心肌细胞自噬性凋亡中的作用机制

• 作者: 黄光强 熊槐 欧阳运琼 绵阳市安州区人民医院麻醉科
• 来源期刊: 川北医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 罗哌卡因 TRPML1 自噬 凋亡
• 年，卷（期）: 2024,（6）
• 页码范围: 12-17
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

目的:基于溶酶体钙离子通道瞬时受体电位粘脂素亚家族1(TRPML1)探讨罗哌卡因在诱导心肌细胞自噬性凋亡中的作用机制。方法:将H9c2心肌细胞分为对照组、ROP诱导组、罗哌卡因+TRPML1抑制剂(1.25μmol/L ML-SI1)、罗哌卡因+活性氧(ROS)清除剂(100μmol/L NAC)组。CCK-8检测各组细胞增殖活性；Annexin V-APC/PI流式细胞术检测细胞凋亡；流式细胞术检测ROS含量和钙离子水平；免疫荧光双染LC3与LAMP-1,观察自噬小体与溶酶体膜蛋白的共定位情况；Western blot检测凋亡相关(Caspase-3、cleaved Caspase-3)、自噬相关(LC3-Ⅱ/Ⅰ、P62)蛋白表达情况。结果:与对照组相比，罗哌卡因诱导组细胞增殖活性降低，细胞内ROS和钙离子含量升高(P<0.05);当TRPML1表达被抑制时，能够降低细胞内ROS和Ca2+水平，同时减少自噬小体的蓄积，改善细胞凋亡。结论:局麻药罗哌卡因通过激活ROS/TRPML1途径致自噬流受阻，从而引起ROS、Ca2+和自噬小体的过度累积，导致心肌细胞出现凋亡。