摘要:

【目的】克隆蝴蝶兰MADS-Box基因并构建其正义和反义植物表达载体，为其功能研究奠定基础。【方法】以蝴蝶兰杂交品种（Phalaenopsis hybrid cv.Jiuhbao Red Rose）为试验材料，采用RT-PCR和RACE技术从花葶中克隆MADS-Box基因，并构建正义和反义植物表达载体。【结果】克隆获得一个蝴蝶兰MADS-Box基因，命名为DtpsMADS1（GeneBank登录号JQ065097）。该基因cDNA全长960 bp，包含37 bp的5'非编码区、185 bp的3'非编码区和一个738 bp的编码区；该基因编码245个氨基酸。生物信息学分析结果表明，该基因编码的蛋白质为碱性亲水性蛋白，具有62.45%的α-螺旋，8.16%的延伸链和29.39%的不规则折叠。序列比对和系统进化分析结果表明，DtpsMADS1与蝴蝶兰ORAP13的亲缘关系最近，同源性达99.0%，与石斛和蕙兰的同源性分别为83.0%和82.0%，属于MADS家族A类亚家族。将DtpsMADS1基因连接到植物表达载体pBI121上，构建获得正、反义植物表达载体pBI121-DtpsMADS1-S和pBI121-DtpsMADS1-A。【结论】成功克隆的蝴蝶兰DtpsMADS1基因属于MADS家族A类亚家族，具有明显的保守性和特异性，可为蝴蝶兰DtpsMADS1基因功能的鉴定及蝴蝶兰的遗传改良奠定基础。

摘要:

本申请植物组织解剖技术领域，具体涉及一种蝴蝶兰冰冻切片处理方法。该方法包括包括组织采样、组织预处理、液氮快速冷冻、冷台固定、冰冻切片、展片、染色、观察和拍照等操作步骤。初步应用效果表明，利用本申请所提供冷冻切片方法进行实际操作时，可获得组织显微结构较完整的切片，并可获得较清晰的蝴蝶兰叶、根、花器官等组织切片图，从而为蝴蝶兰组织结构的观察和研究、以及原位杂交及亚细胞定位等分子技术的应用奠定基础。本申请相关预处理方式的改进，较好降低了冷冻处理过程中植物组织冰晶产生几率。本申请也为其他兰科植物组织的冷冻切片处理方法提供了较好借鉴和参考。

摘要:

【目的】克隆蝴蝶兰MADS-Box基因并构建其正义和反义植物表达载体，为其功能研究奠定基础。【方法】以蝴蝶兰杂交品种（Phalaenopsis hybrid cv.Jiuhbao Red Rose）为试验材料，采用RT-PCR和RACE技术从花葶中克隆MADS-Box基因，并构建正义和反义植物表达载体。【结果】克隆获得一个蝴蝶兰MADS-Box基因，命名为DtpsMADS1（GeneBank登录号JQ065097）。该基因cDNA全长960 bp，包含37 bp的5'非编码区、185 bp的3'非编码区和一个738 bp的编码区；该基因编码245个氨基酸。生物信息学分析结果表明，该基因编码的蛋白质为碱性亲水性蛋白，具有62.45%的α-螺旋，8.16%的延伸链和29.39%的不规则折叠。序列比对和系统进化分析结果表明，DtpsMADS1与蝴蝶兰ORAP13的亲缘关系最近，同源性达99.0%，与石斛和蕙兰的同源性分别为83.0%和82.0%，属于MADS家族A类亚家族。将DtpsMADS1基因连接到植物表达载体pBI121上，构建获得正、反义植物表达载体pBI121-DtpsMADS1-S和pBI121-DtpsMADS1-A。【结论】成功克隆的蝴蝶兰DtpsMADS1基因属于MADS家族A类亚家族，具有明显的保守性和特异性，可为蝴蝶兰DtpsMADS1基因功能的鉴定及蝴蝶兰的遗传改良奠定基础。

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核酮糖1,5￣二磷酸羧化酶/加氧酶是光合碳同化作用的关键酶,它对调节铁皮石斛Rubisco活性和光合速率具有直接的作用,对其进行基因等方面的研究,会对改变植物光合速率打下良好基础。该研究以一年生铁皮石斛叶片为材料,采用 RT￣PCR和 RACE技术成功克隆了Rubisco活化酶( RCA)基因,并对其进行生物信息学分析。结果表明：RCA基因全长1730 bp,命名为RCA2( GenBank登录号KT205842),其中5′￣UTR 81 bp、3′￣UTR 326 bp,开放阅读框1323 bp,编码440个氨基酸,分子质量为48.53 kDa,等电点为6.19,包含P￣loop NTPase超家族基因结构。氨基酸多重序列比对发现RCA2核苷酸序列与蝴蝶兰的相似性高达87％。 RCA2编码蛋白为亲水性蛋白；亚细胞定位于叶绿体基质；蛋白质二级结构分析,α螺旋占30.68％,延伸链占25.45％,不规则折叠占43.86％。 RCA2编码蛋白质的功能预测发现,RCA2在中间代谢起到了一个非常重要的角色。该研究发现对铁皮石斛光合作用关键酶Rubisco 的分析可为其光合作用特性的发掘提供理论基础,并为提高温室大棚栽培效率提供理论依据。

摘要:

鬼针草离体再生体系建立的方法，由五个阶段构成：培养无菌苗；诱导培养生成不定芽；继代增殖培养分化得到丛生芽；丛生芽经生根培养获得生根苗；练苗移栽形成再生植株。整个周期在可控的条件下进行，不受气候条件和鬼针草自然生长周期的限制，子叶诱导率90%～95%，下胚轴诱导率达100%，大大缩短了繁殖周期，不仅可以快速大量繁殖种苗，还能除去病毒、真菌和细菌等危害，保证种苗健壮，获得大量形状一致，遗传稳定性高的鬼针草全草。

摘要:

本发明公开了一个用于蝴蝶兰内参基因的TUA片段序列，本发明通过多序列比对设计简并引物、PCR扩增、测序，获得α-微管蛋白基因（TUA）片段序列，根据所设计荧光定量特异引物，经实时荧光定量PCR检测，确认TUA片段序列为可在蝴蝶兰不同发育阶段不同组织稳定表达的内参基因。

摘要:

本申请属于白及基因工程技术领域，具体涉及一个白及内参基因EF1α及其应用专利申请事宜。该基因包括620bp碱基，如SEQ ID NO.1所示。该基因可作为内参基因用于分析评价相关功能基因、例如蔗糖合成酶基因（SS）的表达情况。总体而言，本申请中首次对白及中的EF1α基因进行了克隆，并对其作为内参基因的功能做了初步研究，结果表明，其可以较好地作为内参基因加以应用，能够较为准确的为相关基因的荧光定量表达分析奠定应用基础，具有较好地实用价值和科研应用价值。

摘要:

以蝴蝶兰和萼脊兰为材料,对其叶片的CO2吸收速率、可滴定酸含量和叶绿素荧光参数的昼夜变化进行研究.结果表明:蝴蝶兰和萼脊兰的CO2交换方式都具景天酸代谢途径(CAM)的特点,其叶片的净CO2吸收速率分别在22:00和凌晨0:00左右达到最大值.蝴蝶兰暗适应下的叶绿素荧光参数最小荧光Fo、最大荧光Fm、最大可变荧光Fv、可变荧光产量与最大荧光产量之比Fv/Fm、光系统Ⅱ潜在活性Fv/Fo均高于萼脊兰.蝴蝶兰和萼脊兰叶绿素荧光参数日动态变化结果表明,蝴蝶兰所需要的光照强度显著低于萼脊兰,太高的光强将引起植株的光抑制,从而引起光化学效率的下降.总的来说,蝴蝶兰为专性CAM兰花,萼脊兰属兼性CAM兰花,在蝴蝶兰与萼脊兰杂交后代的栽培中,在避免过高的光强引起其光抑制的同时,可提供特定的环境条件以诱导其叶片更多地进行C3途径光合,尽量减少CAM途径光合,从而有效地促进其干物质的积累,促进杂交后代的生长.

摘要:

E亚基是液泡型ATP酶(V-ATPase)多亚基复合体的重要组成部分,响应植物的非生物胁迫,对其基因的克隆及分析有助于阐释其逆境条件下的分子调节机制.根据蝴蝶兰低温诱导差异蛋白的序列设计简并引物,利用RT-PCR和RACE技术从蝴蝶兰叶片中克隆获得2条V-ATPaseE亚基的cDNA序列,分别命名为Ph VHA-Ea和Ph VHA-Eb,GenBank登录号分别为KT758849和KT758850.PhVHA-Ea和PhVHA-Eb全长分别为960 bp和1 036 bp,二者均具有687 bp的开放阅读框,编码228个氨基酸,包含相同的vATP-synt_E保守域;生物信息学分析表明,2个序列编码蛋白具有相似的二级结构和相同的亲水性,预测的三级结构也相同.系统进化树分析显示,蝴蝶兰PhVHA-Ea和PhVHA-Eb与单子叶植物液泡型ATP酶E亚基距离最近.

摘要:

本发明属于农作物栽培技术领域，具体涉及一种植物生长调节剂及其在调整蝴蝶兰花序类型中的应用。通过在蝴蝶兰进行诱导花芽的过程中施加植物生长调节剂将具有总状花序类型的蝴蝶兰诱导改变为具有复总状花序类型的蝴蝶兰。本发明植物生长调节剂及方法可以用于蝴蝶兰低温诱导花芽的不同阶段，使用范围较为宽泛，具有较好适应性，试验表明，采用本发明的方法和所提供的植物生长调节剂后，蝴蝶兰花序轴花朵下方的2‑3个休眠芽全部萌发为花序轴，同时对于提高蝴蝶兰的开花质量也有积极的效果。本发明方法适合蝴蝶兰的工厂化栽培，且生产成本低，得到的蝴蝶兰品质高、一致性好，具有低投入、高收益的优点，表现出了较好地推广应用价值。