人血小板生成素cDNA的克隆及在COS-7细胞中的表达

• 作者: 周永春 孙树汉 戴建新 童涌 陆德如 陈蕊雯
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人血小板生成素 逆转录聚合酶链反应 基因表达
• 年，卷（期）: 1998,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 212-214
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.1998.03.004

摘要

目的:克隆人血小板生成素(hTPO) cDNA,并研究其在COS-7细胞中的表达.方法:通过RT-PCR法获得hTPO cDNA,测序后克隆到真核表达载体pED上,以DEAE-dextran法转染COS-7细胞,巨核细胞集落形成培养法测表达产物活性.结果和结论:获得的hTPO cDNA和文献报道的序列一致.转染细胞RNA斑点杂交结果显示TPO cDNA获得转录,转染后48和72 h的细胞上清均可测到TPO活性.pED是一个表达较高的真核表达载体,可用于hTPO cDNA永久性表达研究.