正常人天然IgG抗体噬菌体呈现库的构建

• 作者: 兰风华 刘玉峰 陈苏民 高辉
• 来源期刊: 福州总医院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体呈现 正常人 IGG抗体 重链 表达 天然 κ轻链 IGG亚类 献血员 新鲜血
• 年，卷（期）: fzzyyxb,（1）
• 页码范围: 3-6
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11

摘要

目的：构建一个正常人天然IgG抗体噬菌体呈现库。方法：从一献血员取5ml新鲜血液，分离淋巴细胞，提取孙RNA逆转录合成cDNA．PCR扩增重链Fd和轻链cDNA,依次将PCR产物插入载体pComb3H相应位点。以点印迹检测噬菌体表面Fab的表达。结果：所有4个IgG亚类的重链Fd片段、部分κ轻链和λ轻链cDNA得到扩增。先期插入的重链Fd的实际库容达1．1×10^6，插入率20％。后期插入的轻链库容达1．35×l0^7，插入率接近100％，Fab表达库容达2．70×10^6,噬菌体悬液的点印迹显示有Fab表达。结论：构建了一个正常人IgG的Fab噬菌体呈现库。